[发明专利]一种检测血液中双氧水微电极及其制备方法

说明书

本发明公开了一种检测血液中H₂O₂微电极CFME/Au/BA+NB及其制备方法，属于有机分子探针在生物传感中应用技术领域。本发明首先合成具有H₂O₂特异性识别的电化学探针BA和内参比NB分子，通过Au‑S键将BA分子和NB分子共价键合于采用电化学沉积制备的CFMF/Au电极上，得到H₂O₂检测微电极CFME/Au/BA+NB。该微电极对H₂O₂的响应具有较高的选择性、灵敏度和较宽的线性范围，内参比的引入提高了实际样品检测的准确度和抗污染能力。可以实现微量血液样品的测定，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于有机分子探针在生物传感中应用技术领域，涉及一种用于特异性识别和高准确性检测微量血液中H₂O₂传感器。

背景技术

H₂O₂作为生物体最丰富和最稳定的ROS之一，在各种研究领域得到广泛关注，一方面，H₂O₂在宿主防御、免疫反应和病原体入侵等各种微生物学过程中发挥着重要作用。另一方面，H₂O₂的浓度异常会导致氧化应激发生，对蛋白质和DNA造成严重损伤，进一步导致各种疾病的发生，如老年神经退行性疾病(阿尔兹海默病、帕金森病)及癌症等。因此，开发一种高灵敏、高选择性和高准确性检测H₂O₂水平的方法具有重要的生理学意义。

现有的血液中H₂O₂检测方法主要有荧光法、紫外-可见光谱法、电化学法等。荧光法虽然受到人们广泛的青睐，但对于血液检测由于自身颜色的影响，背景干扰较大；紫外可见光谱法灵敏度较低；电化学法是目前H₂O₂检测常用的方法之一，已从构建的经典的酶生物传感器发展为金属纳米材料及碳纳米材料催化检测H₂O₂的无酶电化学传感器。然而，这两种电化学传感器仍存在以下问题：(1)无酶传感器需要消耗贵金属，且选择性不高，易受其它活性物质影响；(2)酶传感器虽然具有高选择性但酶活性容易受环境影响且灵敏度不高，酶的种类也有限。

发明内容

针对现有电化学传感器的不足，本发明的目的在于提高血液中H₂O₂检测的选择性和准确性。设计合成了一种H₂O₂特异性有机探针BA和内参比分子NB，并制备检测H₂O₂微电极CFME/Au/BA+NB，实现血液中H₂O₂高选择性、高准确度和高灵敏度检测。

本发明所述H₂O₂识别电化学探针BA和参比分子NB，其结构如下所示：

本发明所述CFME/Au/BA+NB的制备方法如下：

(1)H₂O₂识别电化学探针合成

在有机溶剂和缩合剂中，硫辛酸与氨基苯硼酸频哪酯进行脱水缩合反应得到H₂O₂识别电化学探针，反应1如下：

步骤(1)中，所述有机溶剂选择二氯甲烷、甲醇、乙醇、甲苯，优选二氯甲烷；

步骤(1)中所述缩合剂为EDC/NHS，HATU/三乙胺，优选HATU/三乙胺；

步骤(1)中，所述反应温度为0～30℃，优选室温25℃；