[发明专利]一种提升梨组培苗大田移栽成活率的方法

权利要求书

1.一种利用微嫁接技术高效提升梨组培苗大田移栽成活率的方法，其特征在于包含以下步骤：

(1)砧木准备：对消毒后的梨洁净种胚进行培养，长至3～5厘米时选择单根幼苗作为砧木；

(2)接穗准备：选择继代培养20～30天，带有2～3片叶子，茎上无多余分生且叶片舒展的梨组培苗作为接穗；

(3)砧木和接穗处理：砧木处理：将单根砧木幼苗从子叶下方横切，去除子叶及以上部分，保留根部和部分茎段，然后从其顶端纵向劈开约1厘米；接穗处理：将接穗底端削成楔形，与砧木长度尽量保持一致；

(4)微嫁接：将接穗插入砧木劈口中，绑缚锡箔纸并用镊子将四周捏合紧密，将嫁接苗于生根培养基1/2MS+IBA 0.6mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.0g/L PH＝5.90～5.95中进行培养14～16天；

(5)炼苗：选择生根良好的嫁接苗，无菌环境中将锡箔纸摘除，闭瓶炼苗7天；

(6)移栽：将嫁接苗移栽到灭菌的营养土中，浇透水并在营养钵上方覆盖保鲜膜，戳适量小洞透气，置于植物光照培养箱中培养，6～9天嫁接苗生长稳定后摘除保鲜膜继续培养。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的步骤(1)砧木选择野生梨，优选山梨、杜梨和川梨。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于步骤(1)砧木准备：取消毒后的梨洁净种胚在MS+30g蔗糖+7.5g琼脂PH＝5.80～6.0培养基中进行暗培养，待种子子叶变绿，胚根开始伸长，转移至生长培养基MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L+蔗糖30g+琼脂7.5g,PH＝5.80～6.0中光下培养，长至3～5厘米时选择单根幼苗作为砧木。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(1)中梨洁净种胚通过以下方法获得：选择干净的野生梨种子，于无菌环境中进行消毒，消毒方法：75％无水乙醇消毒1分钟，10％次氯酸钠溶液消毒5分钟，期间反复震荡，充分消毒杀菌，每一步消毒处理后用灭菌蒸馏水冲洗3～5次；在灭过菌的滤纸上，用镊子按住消毒后的种子，将刀从种子上方垂直插入远离胚根的一端，尽量不伤害种胚，后倾斜角度沿种子侧边划开种皮，去除内外种皮，取出种胚，期间应避免伤及胚根。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于(2)接穗准备：接穗为在MS+6-BA2.0mg/L+IBA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L PH＝5.8～6.0的培养基中继代培养20～30天的梨组培苗，带有2～3片叶子，茎上无多余分生且叶片舒展。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(6)：移栽时用清水将嫁接苗根部残留的培养基轻轻涮洗干净，移栽到经过121℃20min高温高压灭菌后的营养土中，移栽后浇透水并在营养钵上方覆盖保鲜膜，戳适量小洞透气，置于植物光照培养箱，光照16h；光强2500lx；温度24℃±1℃中培养，一周左右嫁接苗生长稳定后摘除保鲜膜继续培养。