[发明专利]一种从甜菊糖母液中提取莱包迪苷D和莱包迪苷M的方法

说明书

本发明公开了一种从甜菊糖母液中提取莱包迪苷D和莱包迪苷M的方法，其是将甜菊糖母液上样到含有固相吸附材料的色谱分离柱中，用洗脱液洗脱，收集洗脱液，将洗脱液合并，蒸发结晶，即得莱包迪苷D和莱包迪苷M的混合物；其中，所述的固相吸附材料是以苯乙烯‑二乙烯苯共聚物为骨架结构；所述的固相吸附材料的粒径为5～30μm，比较面积为400～1000m²/g，孔径为80～1000A，孔容为0.6～1.2cm³/g。该方法工艺过程简单，分离效率高、工艺废液低。所得莱包迪苷D和莱包迪苷M产品纯度在95％以上。

技术领域

本发明属于生物基原材料分离纯化技术领域，具体涉及一种从甜菊糖母液中提取莱 包迪苷D和莱包迪苷M的方法。

背景技术

甜叶菊原产于巴西和巴拉圭交界的高山草地，当地人使用甜叶菊作为甜茶或者甜味 剂。我国1976年将甜叶菊引入，并且成功种植。目前我国福建、云南为甜叶菊种植地， 每年种植大量的甜叶菊。

甜菊糖苷是多种结构相似的二萜类化合物。常温下呈白色粉末状，极易溶于水、乙醇。具有很好的稳定性。目前是继蔗糖、甜菜糖外的“世界第三糖原”。同时其甜度高 (约为蔗糖的150～300倍)、热量低(约为蔗糖的1/300)。针对高血压、糖尿病、肥胖 病等病患者具有一定的辅助治疗作用。且未发现其具有任何毒性和副作用。目前欧盟委 员会已经允许甜菊糖为食品添加剂。甜菊糖已经广泛应用于食品饮料、医药等行业。

当前广泛应用的甜菊糖苷有甜菊苷(STV)和莱包迪苷A(RA)也是甜菊叶成分最 高的组分。虽然STV和RA具有相当高的甜度，但是其口感上存在一定的后苦味。有研 究表明莱包迪苷D(RD)和莱包迪苷M(RM)具有更好的口感，同时添加一定比例的 莱包迪苷D和莱包迪苷M可以很好的改善STV和RA的后苦味和风味。

专利CN 107404919 A日本守田化学工业株式会社提供一种甜味剂组合物，在RA中添加一定比例的RD和RM作为活性成分。最终得到甜味品质接近食用糖的优良的天 然甜味剂。专利CN 109219355 A可口可乐公司使用莱包迪苷M改善甜味剂，使得甜味 剂属性更接近于蔗糖甜味。

综上所述，使用莱包迪苷D和莱包迪苷M作为甜味调节剂已经被广泛的验证。但 是从甜菊糖母液中分离纯化莱包迪苷D和莱包迪苷M的技术仍然不成熟，造成甜菊糖 作为甜味剂的局限性。

目前国际上主要还是针对STV和RA等组分的分离纯化方法的研究。我国大部分甜菊苷生产企业也只是利用大孔吸附树脂初步的提取STV和RA。然而吸附后甜菊糖母液 糖(提取STV和RA后的母液糖)中含有莱包迪苷D和莱包迪苷M。目前并没有很好 处理方法，往往将母液糖直接当废弃物排掉。这就造成的资源的极大浪费，同时也造成 的环境的污染。

针对以上情况有研究者对RD和RM的分离做了一定的工作。专利CN 103709215 B一种从甜菊糖结晶母液糖中提取莱包迪苷D的方法，通过一次结晶，固液分离得到50％ 左右的RD产品。专利CN 102060892 B甜菊糖苷RD的提纯方法使用大孔吸附树脂吸 附分离RD，可得到纯度40％以上的RD产品，后续需要通过精制可得到纯度95％的RD 产品。专利CN102796152 A制取高Reb-D甜菊糖苷的方法，使用多柱二次树脂串联吸 附提纯甜菊糖苷，其中使用到预处理、脱盐、吸附、解吸附、脱色、离子交换、纳滤、 结晶等工艺最终得到高纯度的莱包迪苷D产品，其中莱包迪苷纯度80％以上。专利 CN108864222A一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，使用非极性吸附树脂Super 200-X19对甜菊糖母液处理，分离纯化得到RD和RM产品。

以上的研究方法都存在一定的局限性：1、重结晶的方法需使用大量的有机溶剂，且 过程繁琐，能耗较大不利于工业放大；2、大孔吸附树脂只能得到相对纯度的莱包迪苷 D和莱包迪苷M产品，同时里面还含有其他甜菊糖苷成分，同时多柱串联对产地、设 备需求过大，一次投入高；3、RA、STV、RD、RM结构相似，单一非极性吸附树脂色 谱分离技术很难做到高纯度单一分离。