[发明专利]一种基于酶催化产物裂解二氧化锰纳米花@硫化镉核壳结构的光电化学检测马拉硫磷的方法

说明书

本发明公开了一种基于酶催化产物裂解二氧化锰纳米花@硫化镉核壳结构的光电化学检测马拉硫磷的方法。该方法将磁珠、捕获DNA和马拉硫磷适配体混合孵育后，利用马拉硫磷与适配体竞争性结合，导致部分拉硫磷适体与磁珠分离，而利用保留在磁珠上的捕获DNA触发RCA反应，形成一条长的单链DNA链，此外，通过与S₂‑Au‑BChE探针杂交，将大量的BChE组装在长单链DNA链上，利用BChE催化ATCh水解生成TCh，实现对MnO₂ NF@CdS的分解，致使其光电流减小，从而建立光电流变化值与拉硫磷浓度的线性相关关系。该方法基于适配体与目标物的特异性识别，同时采用RCA反应放大机制，因此可以实现对目标物浓度高灵敏，高选择性的检测。

技术领域

本发明涉及一种马拉硫磷的检测方法，具体涉及一种基于酶催化产物裂解核-壳MnO₂纳米花@CdS结构的光电化学检测马拉硫磷的方法，属于光电化学生物分析领域。

背景技术

马拉硫磷是一种高效低毒的有机磷农药，在农业上用途十分广泛，几乎在各种粮食商品(稻谷、玉米、小麦、大麦、高粱等)中都有残留。2013年，在日本一大型水产公司冷冻食品中检测出浓度高度超标的马拉硫磷，导致食用者中毒。根据世界卫生组织国际癌症研究机构公布的2017年致癌物清单，马拉硫磷属于2A类致癌物。因此，快速灵敏地检测马拉硫磷极具卫生学意义。

近年来，对于马拉硫磷检测的传统方法主要有气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)以及质谱法(MS)等(【1】E.Cequier,A.K.Sakhi,L.S.Haug,C.Thomsen,Developmentof an ion-pair liquid chromatography-high resolution mass spectrometry methodfor determination of organophosphate pesticide metabolites in large-scalebiomonitoring studies,Journal of chromatography.A,1454(2016)32-41.【2】J.I.Cacho,N.Campillo,P.Vinas,M.Hernandez-Cordoba,In situ ionic liquiddispersive liquid-liquid microextraction coupled to gas chromatography-massspectrometry for the determination of organophosphorus pesticides,Journal ofchromatography.A,1559(2018)95-101.【3】R.Su,D.Li,X.Wang,H.Yang,X.Shi,S.Liu,Determination of organophosphorus pesticides in ginseng by carbon nanotubeenvelope-based solvent extraction combined with ultrahigh-performance liquidchromatography mass spectrometry,Journal of chromatography.B,Analyticaltechnologies in the biomedical and life sciences,1022(2016)141-152.)。尽管这些方法能够同时检测多种物质，具有高的准确性和精密性，但需要价格昂贵的大型仪器且不能直接定性，繁琐的预处理以及对操作者有一定的操作技能要求，所以在快速检验上存在一定局限性，同时限制了他们的广泛应用。开发具有高灵敏和高选择性的新型马拉硫磷检测方法对环境监测，食品安全和疾病诊断都显得尤为重要。