[发明专利]一种HMW-GS全缺失糯小麦的创制方法

说明书

本发明公开了一种HMW‑GS全缺失糯小麦的创制方法，包括如下步骤：(1)将HMW‑GS全缺失小麦和糯小麦人工杂交，获得杂交F₁种子；(2)种植杂交F₁种子，自交收获F₂种子并分单粒，筛选出3个Wx基因位点均不表达Waxy蛋白的单粒糯小麦；单粒糯小麦再刮取胚乳粉末用于SDS‑PAGE鉴定HMW‑GS组成，从中筛选出不表达任何HMW‑GS的单粒种子，该单粒种子即为HMW‑GS全缺失的糯小麦；(3)将HMW‑GS全缺失的糯小麦单粒种子种植，自交收获F₃种子，连续分单粒种植并自交到F₅，分单株种植，F₆稳定后测定品质指标。

技术领域

本发明属于植物生物技术领域，尤其涉及一种自然界天然不存在的HMW-GS全缺失糯小麦的创制方法。

背景技术

小麦胚乳内淀粉和高分子量谷蛋白(High molecular weight gluteninsubunits，HMW-GS)组成和含量是影响小麦面粉加工品质的重要因素。

普通小麦胚乳中淀粉含量占籽粒总重量的70％左右，分为直链和支链两种，二者在总淀粉中的比例相对稳定，约为25％和75％(翟红梅等，2008)。小麦颗粒淀粉结合酶I，也称GBSSI，直接决定小麦直链淀粉的合成、含量以及直链/支链淀粉比例(Vrinten andNakamura 2000)。编码该酶蛋白的基因也称为Wx，分别位于7AS，4AL和7DS上的Wx-A1，Wx-B1和Wx-D1位点(Yan and Bhave，2000；Yan et al，2000)，其对应产物为Waxy蛋白，普通小麦缺失1-2个Waxy蛋白的称为部分糯小麦，3个同时缺失的称为糯小麦，糯小麦直链淀粉含量很低(1％)，甚至不含直链淀粉，几乎全为支链淀粉。自然界天然存在的小麦中，缺失Wx-B1蛋白的很常见，缺失Wx-A1蛋白的较少，而缺失Wx-D1蛋白的非常罕见，Waxy蛋白双缺失型以Wx-A1和Wx-B1蛋白同时缺失较常见，几乎没有其余双缺失型以及三缺失型(糯小麦)(姚金保等，2004；谭彩霞等，2010)。现有糯小麦都是通过人工杂交，聚合沉默的Wx基因(不产生Waxy蛋白)选育的(Nakamura et al.1995；刘广田等，2000；李中安和宁锟2001；李继刚等，2001；姚大年等，2002；张凤琴等，2017)。糯小麦对改良小麦品质有重要作用。Wx-B1缺失的部分糯小麦(Epstein et al.2002)或者添加一定比例的糯小麦面粉有利于改良面条品质(刘爱峰等，2017)。普通小麦添加20％的糯小麦能显著延迟面包变硬，增加面包货架期(Bhattacharya et al.2002)。糯小麦也可以改良馒头品质(高新楼等，2015)，提高酿酒品质(赵国君等,2013)。