[发明专利]一种能同时降解手性除草剂2,4-滴丙酸两种异构体的降解菌株及其生产的菌剂有效
申请号: | 202010095007.1 | 申请日: | 2020-02-17 |
公开(公告)号: | CN111378599B | 公开(公告)日: | 2022-02-25 |
发明(设计)人: | 蒋建东;张龙;陈凯;胡顺利 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A62D3/02;C12R1/01;A62D101/04;A62D101/28;A62D101/22 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬涛 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 降解 手性 除草剂 丙酸 两种异构体 菌株 及其 生产 | ||
1.一株能同时降解手性除草剂2,4-滴丙酸两种异构体的菌株DCP-6,其特征在于分类命名为Sphingopyxis sp. DCP-6,2019年12月23日寄存于中国典型培养物保藏中心,菌种保藏号为CCTCC NO: M 20191084。
2.权利要求1所述的菌株DCP-6在制备降解苯氧羧酸类除草剂两种异构体的菌剂中的应用;所述的苯氧羧酸类除草剂选自(R, S)-DCPP、(R, S)-MCPP中的任意一种或两种。
3.权利要求1所述的菌株DCP-6在制备降解苯氧羧酸类除草剂的菌剂中的应用;所述的苯氧羧酸类除草剂选自2,4-D、MCPA或2,4-DB中的任意一种或多种。
4.一种用权利要求1所述的菌株DCP-6生产的菌剂,其特征在于由权利要求1所述的菌株发酵制得。
5.根据权利要求4所述的菌剂,其特征在于通过以下方法生产而成:
(1)将权利要求1所述的菌株DCP-6的试管种接种于LB培养基摇瓶中,振荡培养至对数期;
(2)将上述培养好的菌种按10 %的接种量接种入种子罐,培养至对数生长期,种子罐所用的培养基配方为:葡萄糖 8 g/L,酵母膏5 g/L,K2HPO4 1 g/L,NaCl 5 g/L,CaCO3 2 g/L,MgSO4 0.2 g/L,大豆油体积比0.1 %,pH值7.2-7.5;
(3)将种子液按10 %的接种量接入生产罐培养,生产罐所用培养基与种子罐培养基相同;
(4)在种子罐和生产罐的培养过程中无菌空气的通气量为1: 0.6-1.2,搅拌速度为180-240 rpm,培养温度为30-35 ℃,全流程培养时间为96-108小时, 发酵结束后菌体数量达到10亿个/mL以上, 发酵液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型或采用泥炭吸附用包装袋分装成固体菌剂剂型。
6.一种制备权利要求4所述的菌剂的方法,其特征在于包含以下步骤:
(1)将权利要求1所述的菌株DCP-6的试管种接种于LB培养基摇瓶中,振荡培养至对数期;
(2)将上述培养好的菌种按10 %的接种量接种入种子罐,培养至对数生长期,种子罐所用的培养基配方为:葡萄糖 8 g/L,酵母膏5 g/L,K2HPO4 1 g/L,NaCl 5 g/L,CaCO3 2 g/L,MgSO4 0.2 g/L,大豆油体积比0.1 %,pH值7.2-7.5;
(3)将种子液按10 %的接种量接入生产罐培养,生产罐所用培养基与种子罐培养基相同;
(4)在种子罐和生产罐的培养过程中无菌空气的通气量为1: 0.6-1.2,搅拌速度为180-240 rpm,培养温度为30-35 ℃,全流程培养时间为96-108小时, 发酵结束后菌体数量达到10亿个/mL以上, 发酵液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型或采用泥炭吸附用包装袋分装成固体菌剂剂型。
7.权利要求4所述的菌剂在降解苯氧羧酸类除草剂中的应用;所述的苯氧羧酸类除草剂选自(R, S)-DCPP、(R, S)-MCPP、2,4-D、MCPA或2,4-DB中的任意一种或多种。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于所述的苯氧羧酸类除草剂选自(R, S)-DCPP、(R, S)-MCPP、2,4-D中的任意一种或多种。
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