[发明专利]具有催化活性的人源尿酸氧化酶及其应用有效
申请号: | 202010095288.0 | 申请日: | 2020-02-17 |
公开(公告)号: | CN111269899B | 公开(公告)日: | 2023-01-31 |
发明(设计)人: | 郭亚楠;张守涛;仇春静 | 申请(专利权)人: | 郑州大学 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12N15/11;C12N15/70;A61K38/44;A61P19/06 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 杨海霞 |
地址: | 450001 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 催化 活性 尿酸 氧化酶 及其 应用 | ||
1.具有催化活性的人源尿酸氧化酶,其特征在于:该酶的序列为SED ID NO:1所示序列进行若干位点氨基酸或氨基酸残基替换所得的重组氨基酸序列,所述氨基酸或氨基酸残基替换具体为以下8个位点的替换:
第112位甲硫氨酸替换为缬氨酸;
第119位组氨酸替换为精氨酸;
第121位甘氨酸替换为谷氨酸或天门冬氨酸;
第208位赖氨酸替换为谷氨酸或天门冬氨酸;
第219位甲硫氨酸替换为亮氨酸;
第222位丝氨酸替换为苯丙氨酸;
第232位亮氨酸替换为丝氨酸;
第240位半胱氨酸替换为酪氨酸;
经过氨基酸或氨基酸残基替换,所获得的人源尿酸氧化酶为尿酸氧化酶H1-UOX,具体氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.如权利要求1所述的人源尿酸氧化酶,其特征在于:所述氨基酸或氨基酸残基替换除了权利要求1所述的8个位点外,还包括以下位点的替换:
第89位丙氨酸替换为苏氨酸;
第91位甘氨酸替换为丙氨酸;
第151位谷氨酰胺替换为脯氨酸;
第233位苏氨酸替换为丙氨酸;
第245位亮氨酸替换为组氨酸;
第249位精氨酸替换为谷氨酰胺;
第252位丙氨酸替换为谷氨酰胺;
经过氨基酸或氨基酸残基替换,所获得的人源尿酸氧化酶为尿酸氧化酶H15-UOX,具体氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示。
3.如权利要求1所述的人源尿酸氧化酶,其特征在于:所述氨基酸或氨基酸残基替换除了权利要求1所述的8个位点外,还包括以下位点的替换:
第89位丙氨酸替换为苏氨酸;
第91位甘氨酸替换为丙氨酸;
第151位谷氨酰胺替换为脯氨酸;
第233位苏氨酸替换为丙氨酸;
第245位亮氨酸替换为组氨酸;
第252位丙氨酸替换为谷氨酰胺;
经过氨基酸或氨基酸残基替换,所获得的人源尿酸氧化酶为尿酸氧化酶H8-UOX,具体氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示。
4.编码权利要求1-3任一项所述人源尿酸氧化酶的基因序列。
5.含有权利要求4所述基因序列的表达载体。
6.含有权利要求5所述表达载体的宿主细胞。
7.制备权利要求1-3任一所述人源尿酸氧化酶的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:将所述人源尿酸氧化酶基因序列转入表达载体;然后将该重组后表达载体转入感受态细胞;利用该感受态细胞为宿主细胞进行人源尿酸氧化酶的表达;最后将细胞进行破碎,分离并纯化人源尿酸氧化酶蛋白,即得。
8.权利要求1所述人源尿酸氧化酶在制备降低尿酸的药物制剂中的应用。
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