[发明专利]一种含有鼠李糖脂的发酵液的制备方法

权利要求书

1.一种含有鼠李糖脂的发酵液的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将产鼠李糖脂的菌株以1-3%的比例接入种子培养基中进行扩大培养，得到种子菌发酵液；

2）将种子菌发酵液以4-5%的接种量接种于灭菌后的发酵罐培养基中；所述发酵罐培养基中含有碳源，所述碳源包括鱼油和樟树油中的至少一种；

所述产鼠李糖脂的菌株为铜绿假单胞菌，其命名为zs1.1，已在2019年12月09日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC 19110，微生物分类命名为铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa；

3）在发酵后的前24h内控制pH值为7.0-8.0，在发酵24h后将pH控制在6.0-6.5之间；发酵期间补充加入碳源，经通气发酵得到含有鼠李糖脂的发酵液。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1）中，所述种子培养基为矿物盐培养基MSM，且含有质量体积比为1-3%的酵母粉。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤1）中，扩大培养的条件为：在25-35℃环境下，摇床转速15-200r/min，培养7-8h。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2）中，所述发酵罐培养基中含有：碳源35-45g/L，NaNO₃ 5.0-5.5g/L，NH₄NO₃ 2.5-3.0g/L，Na₂PO₄ 8-12g/L，KH₂PO₄ 7-8g/L，MgSO₄•7H₂O 0.2-0.4g/L，CaCl₂ 9.5-10.5g/L，微量元素溶液2.5-2.5mL/L，酵母粉0.3-0.7g/L。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤2）中，所述微量元素溶液中含有：FeSO₄•7H₂O 15-20 g/L；ZnSO₄•7H₂O 2.5-3.5 g/L；MnSO₄•2H₂O 2.5-3.5 g/L。

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤2）中，发酵罐培养基的培养基初始pH值调节为6.5-7.5，转速250-350rpm，溶氧量40-50%，罐压0.03-0.05mPa。

7.如权利要求1或6所述的制备方法，其特征在于：步骤3）中：在发酵24h后开始补加碳源，在20-30h、40-50h、70-80h时分别补加0.8-1.2wt%、1.5-2.5wt%、1.5-2.5wt%的碳源；所述碳源包括鱼油、樟树油和棕榈油中的至少一种。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：步骤3）中，发酵总时间为90h以上。