[发明专利]一种防止新冠状病毒样本RNA降解的新方法

说明书

本发明涉及一种防止新冠状病毒样本RNA降解的新方法，属医疗领域。本发明创新性地将强心甙作为防止RNA降解的主要成分，实施方式有多种，为2019新型冠状病毒的检测提供了创新型思路，也可以用于防止其他种类RNA降解。

技术领域

本发明涉及一种防止新冠状病毒样本RNA降解的新方法，属医疗领域。

背景技术

新型冠状病毒肺炎（Novel Coronavirus Pneumonia, NCP）是由2019新型冠状病毒（2019 Novel Coronavirus, 2019-nCoV）感染引起的一种急性传染性疾病。确定是否存在2019-nCoV感染的诊断金标准，就是能在患者体内找到2019-nCoV的存在。而要想找到2019-nCoV并明进行确判定，需要依靠测定2019-nCoV核酸。因此，保证2019-nCoV核酸检测阳性率，直接关系到疫情控制质量。

2019新型冠状病毒（2019 Novel Coronavirus, 2019-nCoV）是一种RNA型病毒。RNA病毒是病毒的一种，属于一级。它们的遗传物质是核糖核酸（RNA ribonucleic acid）。2019新型冠状病毒主要是感染呼吸道。检测和确定是否因2019新型冠状病毒感染，首先是将痰液、咽拭子样本、肺泡灌洗液等进行收集，即首先要完成标本采集、运输及保存，然后是进行荧光-PCR操作，最终确定结果。

RNA的英文名称为Ribonucleic Acid，中文名称为核糖核酸。存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。因此，RNA本质上是蛋白质。RNA在离体后，很容易降解，导致检出率低甚至假阴性。导致RNA降解的原因很多，但主要原因是因为，一方面RNA极不稳定，另一方面就是样本内能够分解RNA的酶很多。由此不难看出，在样本的保存阶段，确保RNA不降解或轻微降解，是极其关键的基础性环节，直接关系到后继操作质量和检出率。因此，收集样本之后，直至进入正式检测流程之前，需要用技术手段保证样本中的病毒RNA不降解，以确保后继检测的检出率。

目前，防止样本中病毒RNA降解的方法，主要是在保存液中使用蛋白质变性剂，如异硫氰酸胍、盐酸胍、尿素、酚类等。这些常规方法，均有其不足之处。例如胍类、尿素等，必须浓度较高才可以发挥作用，由此会导致在储运过程中，温度较低时容易产生结晶和沉淀。酚类等物质本身就是一种原型质毒物，其水溶液很易通过皮肤引起全身中毒，其蒸气由呼吸道吸入，对神经系统损害更大。更何况还需要加热使用，方法学方面不理想。

发明人因长期从事病理技术和诊断工作，使用的样本保存液种类较多，对样本保存技术十分熟悉。在本次新冠病毒疫情爆发后，受长期使用的含植物提取物细胞保存液技术的启发，探索出了可防止病毒样本RNA降解的新技术路线。

发明内容

发明人研究的解决方案，是要实现在病毒样本保存过程中，针对2019-nCoV核酸检测的需要来防止RNA降解。进一步地，可以针对多种病毒样本在保存中防止RNA降解。

发明人经研究发现，以支持核酸检测为目标的防止RNA降解的技术路线，要实现三个技术目标。首先是，在病毒样本进入保存液体系后，要快速对RNA进行变性，防止降解。其次是，要将样本中包含的多种可以分解RNA的酶进行失活，以防止这些酶分解RNA。最后，还要能使已经变性的RNA复活，便于进行后继扩增等检测程序。