[发明专利]牛蒡根多糖在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用

说明书

本发明涉及牛蒡根多糖在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用。本发明中牛蒡根多糖是从牛蒡根中提取，经过灭酶、浸提、过滤、抽滤、离心、乙醇沉淀、大孔树脂脱色、三氯乙酸法脱蛋白等步骤分离纯化得到的，牛蒡根多糖的重均分子量为3000‑5000Da。本发明通过HFD(高脂)饲料诱导建立非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠模型，对牛蒡根多糖治疗NAFLD活性进行研究，发现牛蒡根多糖可以显著降低肝重及肝指数，减少肝脏脂质的积累，缓解肝损伤，调节炎症因子，从而对NAFLD起到积极的治疗作用。

技术领域

本发明涉及牛蒡根多糖在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用，属于医药及保健食品技术领域。

背景技术

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除酒精和其他明确的损肝因素所致，以肝细胞脂肪变性和脂质沉积为主要特征的临床病理综合征，常与肥胖、胰岛素抵抗(IR)、遗传易感性、线粒体和内质网氧化应激等相关。由于肝脏组织中脂肪变性程度和炎症情况的不同，可从单纯性脂肪肝发展成非酒精性脂肪性肝炎，并进一步发展为肝硬化甚至肝癌。

随着人们生活水平的提高，NAFLD的发病率也在逐年增加。目前发达国家中的发病率在20-30％，而中国成年人中的发病率约为15％，NAFLD已成为最常见的慢性肝病之一。NAFLD的病因及发病机制复杂，胰岛素抵抗(IR)、氧化应激和脂质过氧化是当前公认的关键因素，“二次打击”学说仍占主导地位。脂类在肝脏细胞的细胞质内的聚集(第一次打击)触发了一系列的细胞毒素事件(第二次打击)，导致了肝脏的炎症反应。“第一次打击”主要是指脂肪在肝脏细胞内的过度聚集，这一过程已经被证实与胰岛素抵抗(IR)有关，胰岛素抵抗(IR)会导致细胞内甘油三酯的合成与转运功能紊乱。第二次打击为氧化应激反应，是在“第一次打击”的基础上，由活性氧诱导的发生在肝脏实质细胞内的炎症反应。

目前，NAFLD的干预措施主要有两大类，即生活方式的改变和药物治疗。大量的临床研究已经证明，选择健康的食物，控制饮食，积极锻炼身体，可以有效改善NAFLD。此外，天然多糖的活性研究是近年来预防及治疗NAFLD的一个新的热点，牛蒡(Arctium lappa L.)作为一种广泛分布于亚欧地区的菊科草本植物，现已被证实具有治疗糖尿病、降血糖、抗炎等作用，现有研究表明牛蒡子及牛蒡茶对于辅助降低血脂、降体重具有积极的作用，然而目前尚未有关于从牛蒡根中提取出重均分子量为3000-5000Da的牛蒡根多糖对于治疗非酒精性脂肪肝的相关报道。

发明内容

本发明针对牛蒡在代谢类疾病领域研究的不足，提供了一种牛蒡根多糖的新应用，具体涉及牛蒡根多糖在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用。

本发明的技术方案如下：

牛蒡根多糖在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用，其特征在于，所述牛蒡根多糖的重均分子量为3000-5000Da。

根据本发明优选的，所述的牛蒡根多糖的制备方法步骤如下：

(1)选择新鲜的牛蒡根，沸水浴5-10min灭酶，将牛蒡根去皮后切成薄片，以料液质量比1:10加入去离子水，设置浸提条件为60-95℃、50-90min，浸提2-3次，合并浸提液后过滤和抽滤，滤液离心收取上清液；

(2)将步骤(1)中制得的上清液在50-70℃下浓缩至原有体积的1/4-3/4，收集浓缩液；之后加入4倍体积的80-100wt％乙醇过夜醇沉，离心保留沉淀；将沉淀以1：100-500的质量比溶解于去离子水中，离心收取上清液；

(3)将步骤(2)制备得到的上清液进行脱色处理，收集脱色后的澄清液；

(4)在步骤(3)制备的澄清液中加入三氯乙酸，使三氯乙酸的浓度为3-10wt％，充分振荡，离心弃去下层变性蛋白沉淀，上清液用1mol/L NaOH溶液中和，用截留分子量3000-5000Da的透析袋透析，得到保留液，浓缩，即得脱蛋白的粗多糖溶液；