[发明专利]绵羊GHR基因插入/缺失多态性的检测引物对、试剂盒、方法和应用在审
| 申请号： | 202010098387.4 | 申请日： | 2020-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN111118178A | 公开（公告）日： | 2020-05-08 |
| 发明（设计）人： | 张清峰;蓝康澍;曹如;潘传英;林春建;尹静;李飞;赵军军;赵京峰;蓝贤勇 | 申请（专利权）人： | 天津奥群牧业有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 李晶 |
| 地址： | 301600 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 绵羊 ghr 基因 插入 缺失 多态性 检测 引物 试剂盒 方法 应用 | ||
1.一种绵羊GHR基因插入/缺失多态性检测用引物对，其特征在于：所述引物对能够用于PCR扩增包含绵羊GHR基因内含子区插入/缺失多态性位点的片段。
2.根据权利要求1所述的绵羊GHR基因插入/缺失多态性检测用引物对，其特征在于：所述插入/缺失多态性位点为绵羊GHR基因NC_040267.1:g.32005124_32005146位23-bp插入/缺失多态性位点。
3.根据权利要求1或2所述的绵羊GHR基因插入/缺失多态性检测用引物对，其特征在于：所述引物对为：
上游引物：SEQ NO.1；
下游引物：SEQ NO.2。
4.如权利要求1至3任一项所述的绵羊GHR基因插入/缺失多态性检测用引物对在绵羊产羔数分子标记辅助选择育种方面中的应用。
5.一种包含如权利要求1至3任一项所述的引物对的绵羊GHR基因插入/缺失多态性的检测试剂盒。
6.一种利用如权利要求1至3任一项所述的引物对的绵羊GHR基因插入/缺失多态性的检测方法，其特征在于：步骤如下：
以待测绵羊基因组DNA为模板，以引物对为扩增引物，利用PCR扩增包含绵羊GHR基因内含子区插入/缺失多态性位点的片段，对扩增产物进行电泳，根据电泳结果鉴定所述插入/缺失多态性位点的基因型。
7.根据权利要求6所述的绵羊GHR基因插入/缺失多态性的检测方法，其特征在于：所述PCR扩增采用的反应程序为：95℃预变性5min；94℃变性30s，68℃退火30s，72℃延伸12～24s，18个循环，每循环后退火温度减1℃；50℃退火30s，72℃延伸12～24s，25～30个循环；72℃延伸10min；
或者，所述电泳时采用质量浓度为3.0～3.5％的琼脂糖凝胶。
8.根据权利要求6或7所述的绵羊GHR基因插入/缺失多态性的检测方法，其特征在于：根据电泳结果，所述插入/缺失多态性位点的插入/插入基因型II表现为237bp一条带纹，插入/缺失基因型ID表现为237bp和260bp两条带纹，缺失/缺失基因型DD表现为260bp一条带纹。
9.一种如权利要求6至8任一项所述的绵羊GHR基因插入/缺失多态性的检测方法在绵羊产羔数分子标记辅助选择育种方面中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述应用为：所述检测方法得到的插入/缺失多态性位点的基因型作为提高绵羊第3胎产羔数的DNA标记方面中的应用。
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