[发明专利]一株丁香假单胞菌及其在防治苹果轮纹病中的应用

权利要求书

1.一株丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae) 菌株B-1，所述菌株B-1保藏于：中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCC NO: M2015813。

2.一种权利要求1所述的丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae) 菌株B-1制备的生防菌剂，其特征是：所述生防菌剂是菌株B-1发酵上清液或菌株B-1菌悬液。

3.一种权利要求2所述的生防菌剂的应用，其特征是：所述生防菌剂用于果蔬病害防治。

4.根据权利要求3所述的生防菌剂的应用，其特征是：所述生防菌剂用于苹果轮纹病的防治。

5.一种权利要求2所述的生防菌剂的制备方法，其特征是：包括以下步骤：

（1）将菌株B-1划线接种在NA培养基中，于30℃恒温活化培养24 h，得到活化的菌株B-1单菌落A；

（2）将所述活化的菌株B-1单菌落A，接种于装瓶量80mL/250mL的NB培养基中，180 r·min^-1，30℃恒温震荡培养12 h，得到菌株B-1发酵种子液B；

（3）将所述发酵种子液B按1:100的接种量接种到NB培养基中扩大培养，30℃恒温震荡培养24 h，得到10⁹cfu·mL^-1 B-1菌株的细胞培养液C；

（4）将10⁹cfu·mL^-1 B-1菌株的细胞培养液C，在4℃条件下，12000 r·min^-1离心15min，收集的上清液经0.22 µm微孔滤膜过滤，得到菌株B-1发酵上清液，即为生防菌剂；菌体沉淀用无菌水重新悬浮，得到10⁹cfu·mL^-1的菌悬液，即为生防菌剂。

6.根据权利要求5所述的生防菌剂的制备方法，其特征是：所述NA培养基由以下方法制备：取蛋白胨10 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，琼脂粉20 g，加水定容至1000 mL，调节pH值为7.0，121℃高压蒸汽灭菌20 min。

7.根据权利要求5所述的生防菌剂的制备方法，其特征是：所述NB培养基由以下方法制备：取蛋白胨10 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，加水定容至1000 mL，调节pH值为7.0，分装于250mL三角瓶中，装瓶量为80 mL，121℃高压蒸汽灭菌20 min。

8.一种用于防治苹果轮纹病的农药复配剂，其特征是：所述农药复配剂中的有效成分为2,6-二叔丁基对甲酚（BHT）和如权利要求1所述的丁香假单胞菌B-1菌悬液。

9.根据权利要求8所述的农药复配剂，其特征是：所述农药复配剂由以下体积份数的有效成分制成：0.1 mmol·L^-1的2,6-二叔丁基对甲酚溶液1份和10⁵ cfu·mL^-1的丁香假单胞菌B-1菌悬液1份。

10.一种权利要求8或9所述的农药复配剂的应用，其特征是：所述农药复配剂用于苹果轮纹病防治。