[发明专利]一种斑兰叶种苗的高通量繁育方法有效
| 申请号： | 202010100076.7 | 申请日： | 2020-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN111226792B | 公开（公告）日： | 2020-11-24 |
| 发明（设计）人： | 吉训志;秦晓威;胡丽松;郝朝运;闫林;鱼欢;李付鹏;王晓阳;范睿;杨艺秋 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院香料饮料研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 潘颖 |
| 地址： | 571533 海*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 斑兰叶 种苗 通量 繁育 方法 | ||
1.一种斑兰叶种苗的高通量繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：
将斑兰叶母株表面的叶鞘去除，取靠近根端、半木质化的茎段侧芽基部作为外植体，清洗、消毒灭菌；
将灭菌后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导，得到愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基为含有0.01～0.5mg/L TDZ、0.5～2.0mg/L 6-BA的MS培养基；
将愈伤组织接种到丛生芽诱导培养基上进行丛生芽诱导，得到丛生芽；所述丛生芽诱导培养基为含有1.0～2.5mg/L 6-BA、0.1～0.5mg/LNAA的MS培养基；
将丛生芽进行分株后，接种到增殖生根培养基上进行增殖生根，得到完整植株；所述增殖生根培养基为含有1.0～2.5mg/L 6-BA、0.1～0.5mg/L NAA的1/2MS培养基。
2.根据权利要求1所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养基为含有0.03mg/L TDZ、0.5mg/L 6-BA的MS培养基。
3.根据权利要求1所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述丛生芽诱导培养基为含有1.0mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA的MS培养基。
4.根据权利要求1所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述增殖生根培养基为含有1.0mg/L 6-BA、0.1mg/LNAA的1/2MS培养基。
5.根据权利要求1所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导的条件为28±2℃、避光。
6.根据权利要求1所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述丛生芽诱导的条件为28±2℃、光照强度1000～2000lux、光照周期12h/d。
7.根据权利要求1所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述增殖生根的条件为28±2℃、光照强度1500～2500lux、光照周期12h/d。
8.根据权利要求1所述的高通量繁育方法，其特征在于，外植体的长度为3～5mm。
9.根据权利要求1所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述外植体的清洗、消毒灭菌程序为：外植体先用洗涤剂清洗，然后用医用酒精消毒，最后用升汞灭菌。
10.根据权利要求9所述的高通量繁育方法，其特征在于，所述外植体的清洗、消毒灭菌程序为：首先将外植体置于容器内，加入洗涤剂3～4滴，用纱布封口进行流水冲洗10～30min；随后转到无菌操作台上，用75％酒精消毒30～50s后，无菌水洗涤3～4次；再用0.1％升汞灭菌4～8min，无菌水洗涤4～5次，无菌水每次洗涤1～2min，沥干水分。
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