[发明专利]一种具有pH和近红外光双重响应的药物缓释系统的制备方法

权利要求书

1.一种具有pH和近红外光双重响应的药物缓释系统的制备方法，其特征在于：步骤如下：

a、制备氧化石墨烯：将一定量的高锰酸钾和石墨粉缓慢加入到浓硫酸和磷酸的混合溶液中，在50℃水浴中加热搅拌12h后冷却至室温，倒入含有过氧化氢的冰水浴中静置一夜，将产物离心洗涤以除去剩余的酸，自然晾干研磨后即得氧化石墨烯；

b、制备氧化石墨烯/氨基化的介孔二氧化硅：将制备好的氧化石墨烯溶于50mL去离子水中，超声分散2h，待氧化石墨烯溶液完全变成黄色且看不到明显的固状物时，加入一定量的十六烷基三甲基溴化铵，在40℃搅拌2h，再加入一定量的氢氧化钠继续搅拌0.5h，随后加入一定量的正硅酸乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应12h后停止，用去离子水和无水乙醇反复洗涤并干燥，将干燥后的产物放入到无水乙醇和硝酸铵的混合溶液中60℃下回流24h以除去模板剂十六烷基三甲基溴化铵，重复3次，将产物用无水乙醇和去离子水反复洗涤，并在60℃下干燥后研磨，即得氧化石墨烯/氨基化的介孔二氧化硅；

c、制备甲氨蝶呤/氧化石墨烯/氨基化的介孔二氧化硅：称取一定量的氧化石墨烯/氨基化的介孔二氧化硅，加入到40mL一定浓度的甲氨蝶呤溶液中，磁力搅拌24h后离心分离，即得甲氨蝶呤/氧化石墨烯/氨基化的介孔二氧化硅；

d、制备甲氨蝶呤/氧化石墨烯/介孔二氧化硅/海藻酸钠药物缓释系统：将一定量的海藻酸钠溶于pH＝5.5的磷酸盐缓冲溶液中，加入一定量的1-乙基-3-二甲基氨基丙基-碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，在室温下磁力搅拌45min后，将步骤c制备的甲氨蝶呤/氧化石墨烯/氨基化的介孔二氧化硅加入到海藻酸钠溶液中，磁力搅拌12h，将得到的分散液置于表面皿中，并在–45℃下冷冻干燥24h，即得甲氨蝶呤/氧化石墨烯/介孔二氧化硅/海藻酸钠药物缓释系统。

2.根据权利要求1所述一种具有pH和近红外光双重响应的药物缓释系统的制备方法，其特征是：步骤a中加入高锰酸钾的质量为5～7g，加入石墨粉的质量为0.8～1.2g，加入浓硫酸的体积为110～130mL，加入磷酸的体积为12.2～14.4mL，加入过氧化氢的体积为1mL。

3.根据权利要求1所述一种具有pH和近红外光双重响应的药物缓释系统的制备方法，其特征是：所述步骤b中氧化石墨烯的质量是30～50mg，十六烷基三甲基溴化铵的质量是0.5～0.7g，氢氧化钠的质量是30～50mg，正硅酸乙酯的质量是0.8～1.2g，3-氨丙基三乙氧基硅烷的质量是0.3～0.5g。

4.根据权利要求1所述一种具有pH和近红外光双重响应的药物缓释系统的制备方法，其特征是：所述步骤c中加入的氧化石墨烯/氨基化的介孔二氧化硅的质量是280～320mg，甲氨蝶呤溶液的浓度是40～70μg/mL。

5.根据权利要求1所述一种具有pH和近红外光双重响应的药物缓释系统的制备方法，其特征是：所述步骤d中海藻酸钠的质量是0.9～1.2g，磷酸盐缓冲溶液的体积是90～120mL，1-乙基-3-二甲基氨基丙基-碳酰二亚胺盐酸盐的质量是0.94～0.99g，N-羟基琥珀酰亚胺的质量是0.56～0.60g，甲氨蝶呤/氧化石墨烯/氨基化的介孔二氧化硅的质量是300～340mg。

6.根据权利要求1得到的具有pH和近红外光双重响应的药物缓释系统应用于不同pH条件下的药物体外释放：分别配制pH为5.0、6.8和7.4的磷酸盐缓冲溶液，取600mg步骤d制备的甲氨蝶呤/氧化石墨烯/介孔二氧化硅/海藻酸钠药物缓释系统，将其置于分子截留量为3500的透析袋中，并将透析袋分别置于50mL不同pH的磷酸盐缓冲溶液中，恒温37℃磁力搅拌进行药物的体外释放，在药物释放过程中每隔60min取出5mL溶液测定释放出的甲氨蝶呤的量，同时补加5mL新鲜的磷酸盐缓冲溶液。甲氨蝶呤的浓度使用紫外分光光度计测定在302nm处的特征吸收峰强度，根据朗伯-比尔定律计算得到，根据测定的甲氨蝶呤的量计算出不同时间的累积释药百分数。

7.根据权利要求1得到的具有pH和近红外光双重响应的药物缓释系统应用于近红外光响应条件下的药物体外释放：取400mg步骤d制备的甲氨蝶呤/氧化石墨烯/介孔二氧化硅/海藻酸钠药物缓释系统，将其置于分子截留量为3500的透析袋中，随后将透析袋放于50mLpH＝5.0的磷酸盐缓冲溶液中，在搅拌的同时用功率1.0W波长808nm的近红外光照射，在药物释放过程中每隔60min取出5mL溶液测定释放出的甲氨蝶呤的量，同时补加5mL新鲜的磷酸盐缓冲溶液。甲氨蝶呤的浓度使用紫外分光光度计测定在302nm处的特征吸收峰强度，根据朗伯-比尔定律计算得到，根据测定的甲氨蝶呤的量计算出不同时间的累积释药百分数。