[发明专利]一种2019-nCoV新型冠状病毒抗原检测试剂及检测装置

说明书

本发明属抗原检测技术领域，具体涉及一种2019‑nCoV新型冠状病毒抗原检测试剂及检测装置。所述抗原检测试剂包括利用AIE小分子化合物或聚合物直接标记的检测抗体，所述检测抗体采用2019‑nCoV新型冠状病毒IgM或IgG抗体。有益效果在于：试剂制备工艺简单(利用AIE材料直接标记抗体，无需制备纳米粒子环节)；相比于核酸检测试剂，生产环境要求低、感染风险低；检出限低(1ng/mL)，检出准确度高；使用便捷，对操作人员技术要求低；检测迅速(仅需15min)。

技术领域

本发明属抗原检测技术领域，具体涉及一种2019-nCoV新型冠状病毒抗原检测试剂及检测装置。

背景技术

2019年度爆发的新冠病毒引起了国际社会的普遍关注，2020年1月30日世界卫生组织已经宣布这一疫情已经构成“国际关注的突发公共卫生事件”。对于人类来说，疾病始终如影随形，传染病更是人类的大敌，仅在20世纪，天花就夺取了3亿人的性命，1918年4月-1919年5月爆发的西班牙病毒导致了2500万-4000万人死亡，2009年在墨西哥和美国加利福尼亚州爆发的甲型H1N1流感持续了一年多，在全球造成了28.45万人死亡，2014年埃博拉病毒在短短几个月蔓延到了多个国家，死亡人数达到了7000余人。

截止到2020年2月15日，全国已经有66581人确诊新冠肺炎，仍有疑似人数为8969人，在该疾病的诊疗过程中，我们先需要诊断疑似患者是否确实患有新冠肺炎，1月26日，上海之江生物科技股份有限公司研发的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)正式获得国家药监局颁发的医疗器械注册证。产品有效期6个月，批件有效期1年。

但是在临床使用的过程中，目前现有的试剂盒检测效果不佳，部分确诊病人检测了6次核酸试剂都是阴性，对于有的确诊的病人，很多试剂盒的阳性率只有30％-50％，通过咽试子的办法，还是有很多假阴性的，没有发现核酸，核酸检测试剂盒核酸检出率低，许多病例要重复多次检测，有的病人咽拭子阴性但肺细胞灌洗液里有病毒。

诊断新冠肺炎，在分子生物学的手段上，目前常用的办法有两种：一种是病毒的基因测序，另一种是核酸检测。二代测序因为可以检测微量物质，所以可以适用的体液类型更多。但是大多数医院没有测序的设备。尤其是二代测序，不仅仅需要设备，还需要生物信息团队来协助测序结果的解读。但是就算如此，研发阶段的流程和试剂配比的优化，阳参阴参的设立，以及预临床试验也是需要的。而且，因为二代测序的成本高检测周期也比较长，不一定适合做这个检测。

因此，现在的诊断方法以核酸检测(PCR或者real-time PCR)为主，这主要受制于：试剂盒质量(而非产能)，能够承担临床检测的P3实验室(生物安全3级实验室)数量，P3实验室设备的准确性和稳定性，能进行熟练稳定操作的工作人员人数。在实际临床应用的时候，除了高质量的试剂盒以外，样本的类型，样品的收集运输和储存方法，核酸(RNA)提取方法，检测设备(PCR仪器或real-time PCR仪)的准确性和稳定性，操作人员的技术，都会影响到实际的检测效果。除此以外，因为考虑到检测的样品具有高度的传染性，用于做此检测的实验室理论上应是P3实验室。检测实验室内部需要做严格的防护，净化负压等等都是最基本的，对于操作流程也有严格的规范。如果实验室级别达不到，可能存在实验室感染的隐患。

免疫层析试纸技术(Immunochromatographic Assay，ICA)是基于抗原-抗体特异免疫学反应和层析反应的原理，标记了指示剂的抗体会特异性识别与结合如尿样、血样或是唾液等生物样本中的特定待测物，且在试纸条检测区域滞留与显色，并可结合读数仪进行定量检测，达到快速、准确地检测待测物的目的。

现有技术中，通常采用胶体金作为指示剂及有机染料分子的荧光纳米粒子作为指示剂。胶体金在早孕检测、食品安全、环境、农药残留领域得到了应用。但是，胶体金的检出准确度和检测灵敏度均较低，因此，只能用于定性或者对准确度要求不高的定量检测领域。