[发明专利]一种富集病原菌的平衡液及其制备方法和应用有效
申请号: | 202010103394.9 | 申请日: | 2020-02-19 |
公开(公告)号: | CN111269839B | 公开(公告)日: | 2022-06-03 |
发明(设计)人: | 沈弢;张浩 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/20;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人: | 陈丹;张奎燕 |
地址: | 100191 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 富集 病原菌 平衡 及其 制备 方法 应用 | ||
本申请公开一种富集病原菌的平衡液,所述平衡液包括10%w/v‑20%w/v葡萄糖、5%w/v‑10%w/v甘露糖、2%w/v‑5%w/v半乳糖和2%w/v‑5%w/v麦芽糖。本申请还提供所述平衡液的制备方法。所述平衡液可以简单,快速地包裹Fe3O4纳米磁珠和标本中的病原菌,增加了纳米磁珠与病原菌的结合,提高了磁珠的富集效果。
技术领域
本申请涉及病原菌检测领域,具体地涉及一种富集病原菌的平衡液及其制备方法和应用。
背景技术
对于感染性疾病患者,早期诊断早期治疗对疾病的预后具有巨大的影响。但是,在细菌,真菌或病毒感染早期,从临床液体标本中,例如组织液、血液、脑脊液、胸腹水、尿液、痰液等,很难直接检测到病原菌。因此,对于这些液体性标本,提高病原菌的检出率具有重要的临床诊断意义。
发明内容
以下是对本文详细描述的主题的概述。本概述并非是为了限制权利要求的保护范围。
针对这些问题,本发明提供了一种平衡液,所述平衡液可以简单,快速地包裹Fe3O4纳米磁珠,从而完成磁珠的改良,而且此平衡液还可以包裹标本中的病原菌,从而更加增加了纳米磁珠与病原菌的结合,极大地提高了磁珠的富集效果。
具体地,本申请提供一种富集病原菌的平衡液,所述平衡液包括10%w/v-20%w/v葡萄糖、5%w/v-10%w/v甘露糖、2%w/v-5%w/v半乳糖和2%w/v-5%w/v麦芽糖。
在本申请中,所述平衡液包括15%w/v-20%w/v葡萄糖、8%w/v-10%w/v甘露糖、4%w/v-5%w/v半乳糖和4%w/v-5%w/v麦芽糖。
在本申请中,所述平衡液还可以包括组胺、鞘氨醇、定菌磷、苯并噻唑、咪唑丙烯酸和谷氨酰胺。
在本申请中,所述平衡液还可以包括2.5%w/v-5%w/v交联剂;
所述交联剂可以选自糊精、乙烯基三乙氧基硅烷、硼酸和对甲苯磺酸中的任一种或更多种。交联剂的作用是将平衡液中的各组分均匀分布,使得有效成分能够更加紧密的附着与磁珠和病原菌的表面。
在本申请中,所述病原菌可以为真菌或细菌。
本申请还提供所述平衡液的制备方法,所述制备方法包括:
将葡萄糖、甘露糖、半乳糖、麦芽糖溶解在溶剂中。
在本申请中,所述制备方法还包括:
加入组胺、鞘氨醇、定菌磷、苯并噻唑、咪唑丙烯酸和谷氨酰胺、以及交联剂,混匀,过滤,获得平衡液。
在本申请中,所述制备方法包括:将葡萄糖、甘露糖、半乳糖、麦芽糖溶解在溶剂中,加入组胺、鞘氨醇、定菌磷、苯并噻唑、咪唑丙烯酸和谷氨酰胺、以及交联剂,混匀,过滤,获得平衡液。
在本申请中,可以在10-40℃下,溶解葡萄糖、甘露糖、半乳糖和麦芽糖。
在本申请中,所述溶剂可以为0.9%氯化钠水溶液。
在本申请中,溶剂均为生理盐水,尽量维持细胞稳定的形态,利于样本的储存。平衡液用于磁珠的改良,以及标本中病原菌的包裹,极大地提高了磁珠富集病原菌的效果。所有操作均在常温下进行;平衡液的配制简单,快速。磁珠的改良处理一步完成,操作简单方便。标本经平衡液处理后,更提高了病原菌的检出率;使用磁珠富集后进行培养,经平衡液处理磁珠和标本后,富集培养后的菌落数明显增加,未经平衡液处理时,菌落数明显比处理组的少。
在本申请中,过滤可以使用0.22μm过滤器进行。
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