[发明专利]一种干细胞无血清培养基及其应用有效
申请号: | 202010104684.5 | 申请日: | 2020-02-20 |
公开(公告)号: | CN111206017B | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 欧阳宏伟;张琴;章佳燕 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人: | 向庆宁 |
地址: | 310000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 干细胞 血清 培养基 及其 应用 | ||
1. 一种干细胞无血清培养基,由基础培养基成分和适用于干细胞的血清代替物组成,所述血清代替物包括白蛋白代替物、生长因子合成肽和粘附因子合成肽,其特征在于,所述白蛋白代替物为聚乙烯醇,聚乙烯醇浓度为10mg/mL;所述生长因子合成肽由重组人EGF合成肽1~100ng/mL、重组人bFGF合成肽1~100ng/mL、重组人IGF合成肽1~100ng/mL、重组人PDGF-AA合成肽1~100ng/mL、重组人PDGF-BB合成肽1~100ng/mL、重组人合成肽TGF-β1 1~50ng/mL组成;所述粘附因子合成肽为重组人纤连蛋白合成肽0.1~20μg/mL;所述重组人EGF合成肽的序列为Asp-Val-Val-Asp-Ala-Asp-Glu-Tyr-Leu-Ile-Pro-Gln或Cys-Met-His-Ile-Glu-Ser-Leu-Asp-Ser-Tyr-Thr-Cys,重组人bFGF合成肽的序列为Lys-Arg-Thr-Gly-Gln-Tyr-Lys-Leu或Pro-Ala-Leu-Pro-Glu-Asp-Gly-Ser-Gly-Ala-Phe-Pro-Gly -His-Phe-Lys-Asp-Pro-Lys-Arg-Leu-Tyr,重组人IGF合成肽的序列为Tyr-Phe-Asn-Lys-Pro-Thr-Gly-Tyr-Gly-Ser-Ser-Arg-Arg-Ala-Pro-Gln-Thr或Gly-Tyr-Gly-Ser- Ser-Ser-Arg-Arg-Ala-Pro-Gln-Thr或Nap-FFG-GYGSSSRRAPQT或Ala-Leu-Leu-Glu-Thr- Tyr-Cys-Ala-Thr-Pro-Ala-Lys-Ser-Glu,重组人PDGF-AA合成肽为重组人PDGF-AA,重组人PDGF-BB合成肽的序列为Cys-Ser-Arg-Asn-Leu-Ile-Asp-Cys-OH,重组人合成肽TGF-β1的序列为KVLALYNK-NH2,重组人纤连蛋白合成肽的序列为Trp-Gln-Pro-Arg-Ala-Arg-Ile。
2.根据权利要求1所述的无血清培养基,其特征在于,所述血清代替物还包括激素、转运蛋白、多胺类、脂类、矿物质、糖类、有机酸、氨基酸、还原剂、维生素、微量元素、抗生素、缓冲剂和pH值调节剂中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的无血清培养基,其特征在于,所述基础培养基为DMEM、DMEM/F12、α-MEM、IMDM、mTesR或E8培养基。
4.如权利要求1~3任一项所述的干细胞无血清培养基在干细胞培养中的应用。
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