[发明专利]一种新型冠状病毒检测试剂盒、用途及其使用方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒主要包括引物探针混合物，所述引物探针混合物由Orf1ab基因、N基因、S基因以及内质控品基因特异性的正、反向引物及特异性的探针组成；

所述Orf1ab基因的正向引物的序列如SEQ ID NO：1所示；

所述Orf1ab基因的反向引物的序列如SEQ ID NO：2所示；

所述N基因的的正向引物的序列如SEQ ID NO：3所示；

所述N基因的反向引物的序列如SEQ ID NO：4所示；

所述S基因的正向引物的序列如SEQ ID NO：5所示；

所述S基因的反向引物的序列如SEQID NO：6所示；

所述Orf1ab基因的探针的序列如SEQ ID NO：7所示；

所述N基因的探针的序列如SEQ ID NO：8所示；

所述S基因的探针的序列如SEQ ID NO：9所示；

所述内质控品的正向引物的序列如SEQ ID NO：10所示；

所述内质控品的反向引物的序列如SEQ ID NO：11所示；

所述内质控品的探针序列如SEQ ID NO：12所示。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述探针的两端分别带有荧光基团和猝灭基团，所述荧光基团为FAM、ROX、VIC、TET和CY5中的一种，所述猝灭基团为BHQ1、BHQ2、BHQ3和MGBNFQ中的一种。

3.如权利要求1-2任意一项所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PCR反应液，所述反应液包括如下成分：Tris-HCl pH＝8.5 1-10mM，KCl 1-5mM，MgCl₂6-12mM，dATP0.5-2mM，dCTP 0.5-2mM，dGTP 0.5-2mM，dUTP 2-4mM，DTT 1-5mM。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述反应液包括如下成分：Tris-HCl pH＝8.5 5mM，KCl 4mM，MgCl₂ 8mM，dATP 0.8mM，dCTP0.8mM，dGTP 0.8mM，dUTP 2mM，DTT 2mM。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PCR酶液，所述PCR酶液包括如下体积比的成分：Hot Start Taq 10-50％，UNG 1-20％，HiScriptReverseTranscriptase1％-10％，TaqSSB 10-50％，Anti-Taq 1-50％，甘油10-50％。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述PCR酶液由如下体积比的成分组成：Hot Start Taq 15％；Anti-Taq 15％；UNG 7％；HiScriptReverse Transcriptase 8％；TaqSSB 15％；甘油40％。