[发明专利]一种检测肿瘤标志物的生物传感器有效
申请号: | 202010105897.X | 申请日: | 2020-02-20 |
公开(公告)号: | CN111273025B | 公开(公告)日: | 2021-11-16 |
发明(设计)人: | 苗向阳;朱小立;毛东升;王兆寅;严丹红;朱志强;葛林 | 申请(专利权)人: | 苏州健雄职业技术学院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/574;G01N33/543;C12Q1/6825 |
代理公司: | 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙) 32267 | 代理人: | 刘燕娇 |
地址: | 215411 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 肿瘤 标志 生物 传感器 | ||
1.一种检测肿瘤标志物的生物传感器,其特征在于,所述生物传感器由以下步骤制成:
I. 使用免疫磁珠来选择性分离靶标;
II.将适体-触发器结合在靶标上,形成免疫磁珠/靶标/适体-触发器三明治结构;
III.固定在免疫磁珠表面上的适体-触发器在存在圆模板1和DNA聚合酶的情况下启动线性滚环扩增,生成线性滚环扩增的产物;
IV.GOD标记的辅助引物2和圆模板2与步骤III中的线性滚环扩增的产物结合,形成三元复合物,辅助引物2启动分支滚环扩增,生成分支产物;
V.GOD标记的辅助引物1和圆模板1与步骤IV中的分支产物结合,形成另一个三元复合物并启动二级分支滚环扩增,获得所述生物传感器;
所述靶标为血小板衍生生长因子-BB;
所述DNA聚合酶为phi29-DNA聚合酶;
所述GOD标记采用的交联剂为磺基琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-甲酸;
所述圆模板1的核酸序列为SEQ ID NO.1、
所述圆模板2的核酸序列为SEQ ID NO.2、
所述适体的核酸序列为SEQ ID NO.3、
所述触发器的核酸序列为SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5;
所述辅助引物1的核酸序列为SEQ ID NO.6;
所述辅助引物2的核酸序列为SEQ ID NO.7。
2.根据权利要求1所述的一种检测肿瘤标志物的生物传感器,其特征在于,所述辅助引物1和辅助引物2的5’端均经过巯基修饰。
3.如权利要求 1-2任一项所述的检测肿瘤标志物的生物传感器在制备检测肿瘤的试剂盒中的应用。
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