[发明专利]鉴别触珠蛋白表型的成套设备及方法

权利要求书

1.MALDI-TOF质谱仪在鉴别触珠蛋白表型中的应用。

2.鉴别触珠蛋白表型的成套设备，其特征在于：所述成套设备包括MALDI-TOF质谱仪、MALDI-TOF质谱检测用试剂和可读载体；

所述可读载体记载如下：

若还原后的待测样品经MALDI-TOF质谱仪检测得到的蛋白质谱图中出现质荷比9180～9200的峰，没有出现质荷比15935～15955的峰，则待测样品的触珠蛋白表型被鉴别为Hp1-1型；若还原后的待测样品经MALDI-TOF质谱仪检测得到的蛋白质谱图中出现质荷比15935～15955的峰，没有出现质荷比9180～9200的峰则待测样品的触珠蛋白表型被鉴别为Hp2-2型；若还原后的待测样品经MALDI-TOF质谱仪检测得到的蛋白质谱图中同时出现质荷比9180～9200的峰和质荷比15935～15955的峰，则待测样品的触珠蛋白表型被鉴别为Hp2-1型。

3.根据权利要求2所述的成套设备，其特征在于：所述MALDI-TOF质谱检测用试剂包括芥子酸基质。

4.根据权利要求2或3所述的成套设备，其特征在于：所述还原后的待测样品为利用二硫苏糖醇还原试剂对待测样品进行还原后得到的。

5.鉴别触珠蛋白表型的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：用MALDI-TOF质谱仪检测还原后的待测样品，得到还原后的待测样品的蛋白质谱图，根据蛋白质谱图中出现的质荷比鉴别触珠蛋白表型：若蛋白质谱图中出现质荷比9180～9200的峰，没有出现质荷比15935～15955的峰，则待测样品的触珠蛋白表型被鉴别为Hp1-1型；若蛋白质谱图中出现质荷比15935～15955的峰，没有出现质荷比9180～9200的峰，则待测样品的触珠蛋白表型被鉴别为Hp2-2型；若蛋白质谱图中同时出现质荷比9180～9200的峰和质荷比15935～15955的峰，则待测样品的触珠蛋白表型被鉴别为Hp2-1型。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述MALDI-TOF质谱仪的设置参数如下：激光频率为1000Hz，激光能量为5.2μJ，检测器电压为-0.75kV，Focus Mass为10000Da，采集质荷比范围为5000Da-20,000Da。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述还原后的待测样品为利用二硫苏糖醇还原试剂对待测样品进行还原后得到的待测样品；优选的，所述还原为在95℃还原5min。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述待测样品与二硫苏糖醇还原试剂的体积比1:5～1:19，所述二硫苏糖醇还原试剂中二硫苏糖醇的含量为80～120mM，碳酸氢铵的含量为25mM。

9.根据权利要求5-8任一所述的方法，其特征在于：用MALDI-TOF质谱仪检测还原后的待测样品的方法，包括如下步骤：

将还原后的待测样品与芥子酸基质进行混合，得到混合液；

将芥子酸基质点在MALDI-TOF质谱仪的靶板的每个孔，待芥子酸基质干燥结晶后，得到预制靶板；

将所述混合液点在所述预制靶板的每个孔上，干燥后置于MALDI-TOF质谱仪进行分析。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述还原后的待测样品与芥子酸基质的体积比1:5～1:19；所述芥子酸基质中芥子酸的含量为10-20mg/mL、乙腈的体积百分含量为30-40％和乙醇的体积百分含量为10-20％。