[发明专利]一种新型冠状肺炎病毒快速检测试纸条及其应用

说明书

本发明公开了一种新型冠状肺炎病毒快速检测试纸条及其应用，属于生物技术检测领域。具体地，新型冠状肺炎病毒先与ACE2受体活性的固相化的类N95膜结合，形成ACE2受体和病毒固相化结合物，通过加病毒RNA序列互补的特异性探针，形成ACE2受体‑病毒‑探针的三分子复合物，由于探针上标记显色试剂，显色即病毒阳性，不显色即为病毒阴性法。本发明具有简单快速、无需抽血、可以实现居家或现场检测、特异灵敏、无需辅助试剂和仪器、肉眼观察结果等特点，成为当今最快速简便的新型冠状肺炎病毒的检测技术。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种新型冠状肺炎病毒快速检测试纸条及其应用。

背景技术

新型冠状肺炎病毒冠状病毒为不分节段的单股正链RNA病毒，属于巢病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)正冠状病毒亚科(Orthocoronavirinae)，根据血清型和基因组特点冠状病毒亚科被分为α、β、γ和δ四个属。已知感染人的冠状病毒有6种，包括α属的229E和NL63，β属的OC43和HKU1、中东呼吸综合征相关冠状病毒(MERSr-CoV)和严重急性呼吸综合征相关冠状病毒(SARSr-CoV)。此次从武汉市不明原因肺炎患者下呼吸道分离出的冠状病毒为一种属于β属的新型冠状肺炎病毒。

冠状病毒有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，经常为多形性，直径50～200nm。S蛋白位于病毒表面形成棒状结构，作为病毒的主要抗原蛋白之一，是用于分型的主要基因。N蛋白包裹病毒基因组，可用作诊断抗原。对冠状病毒理化特性的认识多来自对SARS-CoV和MERS-CoV的研究。病毒可经空气飞沫等途径传播，具高致病性，可引起死亡，目前没有有效的治疗药物，主要通过早期诊断及对症治疗的方式。临床发现患者早期没有明显症状或者发热现象，但此时患者传播力极强，因此出现了后来的新型冠状肺炎病毒的早期诊断方法。

新型冠状肺炎病毒的早期诊断方法较多，主要涉及血清学、分子生物学领域，比较常用的有RT-PCR核酸分子检测和血清IgM抗体ELISA检测等方法，但这些方法均存在一定的缺陷：

RT-PCR核酸分子检测是新型冠状肺炎病毒早期检测方法中灵敏度最高的方法，通过检测患者咽喉部拭子病毒判断感染情况，需要专业的技术人员和昂贵的荧光PCR扩增仪，基层医疗部门比较难开展该诊断方法。另外，在采集患者咽喉部细胞时，较容易引起患者不适造成反呕或者呕吐发生，给医务人员工作增加困难，同时也容易增加采样室病毒污染的风险。最后，新型冠状肺炎病毒主要在下呼吸道，采集患者咽喉部细胞存在较高的假阴性，甚至有报道7次咽喉部拭子核酸检测阴性，第8次变为阳性的报道。

血清学IgM/IgG抗体ELISA检测主要通过检测血清中新型冠状肺炎病毒IgM抗体了解患者近期感染病毒的情况，但需要抽血完成，且IgM/IgG一般在感染2周后才出现，不利于早期诊断，且给临床医护人员操作带来一定的难度。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种新型冠状肺炎病毒快速检测试纸条，用以实现新型冠状肺炎病毒的现场快速检测。

本发明的第二目的在于提供一种新型冠状肺炎病毒快速检测试纸条在新型冠状肺炎病毒快速检测中的应用，具有简单快速、无需抽血、可以实现居家或现场检测、特异灵敏、无需辅助试剂和仪器、肉眼观察结果等特点。

为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种新型冠状肺炎病毒快速检测试纸条，包括：固相化结合膜、用于检测新型冠状肺炎病毒的特异性探针和缓冲液；

所述固相化结合膜为熔喷聚丙烯膜，在熔喷聚丙烯膜上负载有ACE2受体蛋白。

进一步地，所述用于检测新型冠状肺炎病毒的特异性探针序列为用于检测新型冠状肺炎病毒的ORF1ab基因的荧光探针或用于检测新型冠状肺炎病毒的N基因的荧光探针。

进一步地，所述用于检测新型冠状肺炎病毒的ORF1ab基因的荧光探针序列为：