[发明专利]一种数字ELISA检测装置与检测方法在审
申请号: | 202010108352.4 | 申请日: | 2020-02-21 |
公开(公告)号: | CN111273000A | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 赵祥伟;崔玉军 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543 |
代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人: | 朱欣欣 |
地址: | 210096 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 数字 elisa 检测 装置 方法 | ||
1.一种数字ELISA检测装置,其特征在于:包括光纤传像束(1)、图像传感器(2)、图像采集电路(3)、检测微室(4)、磁性微球(5)以及线圈(7);所述光纤传像束(1)的上端面设有至少2个检测微室(4);所述光纤传像束(1)下端设有图像传感器(2),所述图像传感器(2)与图像采集电路(3)相连;所述光纤传像束(1)外侧设有线圈(7),通过线圈(7)产生磁场,并使磁性微球(5)进入检测微室(4)内。
2.根据权利要求1所述的一种数字ELISA检测装置,其特征在于:所述检测微室(4)的直径小于100微米,所述检测微室(4)的深度小于100微米。
3.根据权利要求1所述的一种数字ELISA检测装置,其特征在于:每个检测微室(4)内放置一个磁性微球(5);所述磁性微球(5)上修饰有特异性抗体(6)。
4.根据权利要求3所述的一种数字ELISA检测装置,其特征在于:所述特异性抗体(5)包括依次设置的抗体、抗原以及标记二抗。
5.根据权利要求4所述的一种数字ELISA检测装置,其特征在于:所述标记二抗的标记为酶标记或荧光标记。
6.根据权利要求5所述的一种数字ELISA检测装置,其特征在于:所述酶标记为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶;所述荧光标记为荧光染料标记、荧光量子点标记或上转换发光标记。
7.根据权利要求1所述的一种数字ELISA检测装置,其特征在于:所述图像采集电路(3)包括FLASH模块、FPGA模块、电压控制模块以及接口模块;
所述FLASH模块,用于视频或图像的短暂存储;
所述FPGA模块,作为控制核心用于对图像的处理;
所述电压控制模块,为电路板提供稳定电源;
所述接口模块,用于将采集的图像传给计算机,实现与外部设备的通讯。
8.根据权利要求1所述的一种数字ELISA检测装置,其特征在于:所述图像传感器(2)为CCD 图像传感器或CMOS图像传感器。
9.一种利用权利要求1-8所述的数字ELISA检测装置进行检测的方法,其特征在于:当标记二抗的标记为酶标记时,所述检测方法步骤如下:
(a)在磁性微球(5)表面修饰上待检测的特异性抗体(5);
(b)将磁性微球(5)平铺到检测微室(4)中,线圈(7)通电控制磁场,并使磁性微球(5)落入检测微室(4)中;
(c)在光纤传像束(1)表面的微孔阵列中加入显色溶液,再涂上一层氟化油进行微区隔离,并将多余的磁性微球(5)冲走;
(d)明场光源照射在光纤传像束(1)上表面,软件控制拍摄图片,若检测微室(4)中有磁性微球(5)则该检测微室(4)为暗,若检测微室(4)中无磁性微球(5)则该检测微室(4)为亮,设置合适的阈值区别出亮暗微室数,计暗微室总数为Na;
(e)关闭光源,计算机把通过图像采集电路(3)控制长曝光,拍摄此时的图片,此过程中亮微室数计为Nl;
(f)将前两次图像进行比对分析,通过Na与Nl计算得到模板待测物质的数量。
10.一种利用权利要求1-8所述的数字ELISA检测装置进行检测的方法,其特征在于:当标记二抗的标记是荧光染料标记时,包含以下步骤:
(a)在磁性微球(5)表面修饰上待检测的特异性抗体(5);
(b)将磁性微球(5)倒入检测光纤传像束(1)中,线圈通电控制磁场,并使磁性微球(5)落入检测微室(4)中,使用纸板刮擦磁性微球(5)使其进入检测微室(4)内;再涂上一层氟化油进行微区隔离,并将多余的磁性微球(5)冲走;
(c)光源照射在光纤传像束(1)上表面,软件控制拍摄图片,若检测微室(4)中有磁性微球(5)则该检测微室(4)为暗,计暗微室总数为Na;若微室中无磁性微球(5)则该检测微室(4)为亮;
(d)使用荧光染料激发波长的光照射在光纤传像束(1)上表面,软件控制拍摄此时的图片,若检测微室(4)中有磁性微球(5)且该磁性微球(5)结合有待测抗原,则该检测微室(4)为亮,亮微室数计为Nl,若检测微室(4)中有磁性微球(5)且该磁性微球(5)没结合有待测抗原,则没有荧光,则该检测微室(4)为暗;
(e)计算机把通过图像采集电路(3)采集的两次图像进行比对分析,通过Na与Nl计算得到模板待测物质的数量。
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