[发明专利]特异性结合脂阿拉伯甘露聚糖的单克隆抗体及其在分枝杆菌检测中的应用

说明书

本发明公开了一种特异性结合脂阿拉伯甘露聚糖的单克隆抗体及其在分枝杆菌检测中的应用，涉及抗体技术领域。本发明公开的抗体，其轻链和重链的互补决定区具有如下(1)‑(3)任一项所示的序列。本发明公开的抗体具有高敏感性、高特异性和高亲和力的特点，可以用于检测LAM和分枝杆菌，有助于提高检测结果的准确性。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及一种特异性结合脂阿拉伯甘露聚糖的单克隆抗体及其在分枝杆菌检测中的应用。

背景技术

分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)是其细胞壁上的一种重要糖脂组分，分子量为17.5kDa。在结核分枝杆菌(Mtb)感染期间，可溶性的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)可以通过细菌代谢或细菌降解释放出来，并在体液(如痰、血和尿)中被检测到，但局限于活动性结核病患者中。依据该特征，LAM已被用作诊断活动性结核病的靶点。酶联免疫吸附实验和LAM侧流尿检测已被开发用于测定LAM。低成本、快速的LAM侧流尿检测试剂盒(LF-LAM；Determine TB-LAM；Alere,USA)已经被WHO批准用于CD4阳性T淋巴细胞计数低于200cells/μl的艾滋病患者中结核病筛查，该试剂盒应用兔抗LAM多克隆抗体检测该抗原。尽管该方法在结核分枝杆菌LAM抗原检测方面具有很高特异性，具有低成本和快速便捷的突出特点。但该方法也存在不足之处，其检测敏感性局限于1ng/ml，此法并未被推介用于非艾滋病的结核病筛查，而这部分人群占据了结核病人群的绝大多数(85％)，限制了其在全球范围内的应用。

目前存在三种假说解释无HIV感染的结核病患者中LAM检测的低敏感性：假说一认为HIV感染期间，当存在HIV相关肾病时，肾小球膜受损，LAM通过肾脏滤过至尿液；假说二认为当活动性结核病累及肾脏时，LAM释放到患者尿液；假说三认为活动性结核病患者尿液或血液中LAM丰度较低，超出了当前检测方法的界值，或其与尿液或血液中的其他蛋白结合掩盖其检测。近期研究发现，当LAM存在时，预先浓缩尿液会使其更容易被测到，结果支持假说三。

以上这些为尿液LAM检测辅助诊断活动性结核病提供依据，具有更高检测敏感性和亲和力抗体的应用将进一步优化该检测方法。因此，设计利用高亲和力的抗体用于尿液中LAM的捕获和检测可能提高LAM检测的敏感性。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明目的在于提供一种特异性结合脂阿拉伯甘露聚糖的单克隆抗体及其在分枝杆菌检测中的应用。本发明提供的抗体具有高敏感性、高特异性和高亲和力的特点，可以用于检测LAM和分枝杆菌感染(尤其是结核分枝杆菌)，有助于提高检测结果的准确性。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供一种特异性结合脂阿拉伯甘露聚糖的抗体或其功能性片段，其轻链和重链的互补决定区具有如下(1)-(3)任一项所示的序列：

(1)：

轻链的CDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1-3所示；

重链的CDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.13-15所示；

(2)：

轻链的CDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.4-5所示；

重链的CDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.13-15所示；

(3)：

轻链的CDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.6-8所示；

重链的CDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.16-18所示。