[发明专利]基于表面增强拉曼光谱的羟基山椒素快速检测方法

说明书

本发明属于食品快速检测技术领域，涉及一种基于表面增强拉曼光谱的羟基山椒素快速检测方法；首先制备不同浓度的羟基‑α‑山椒素标准溶液，依次加入到含有SERS基底材料的悬液、无机盐凝聚剂，混合均匀，扫描获得拉曼光谱图，测定定量基准峰位移处的拉曼峰强度值I，与其相对应的羟基‑α‑山椒素标准溶液浓度绘制标准曲线；然后制备待测样品溶液，进一步得到待测样品溶液的拉曼光谱图，根据得到的羟基‑α‑山椒素标准曲线计算得到待测液中总羟基山椒素的浓度，最后计算出花椒样品中总羟基山椒素的含量。本发明操作简单、检测成本低，所需样品量少，可便携，适用于现场大规模花椒样品的检测，为羟基山椒素的智能化分析检测提供技术参考。

技术领域

本发明属于食品快速检测技术领域，具体涉及一种基于表面增强拉曼光谱的羟基山椒素快速检测方法。

背景技术

花椒，位列调味料“十三香”之首，是一种我国传统的药食同源植物，具有色泽饱满、鲜香味麻等特点，受到人们的广泛青睐。花椒的主要麻味物质为羟基山椒素，主要包括羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、羟基-ε-山椒素等类型，羟基山椒素总含量是评价花椒品质的一个重要指标。

目前，检测羟基山椒素的方法主要有液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS)，紫外分光光度法，薄层层析法等。其中，HPLC-MS虽能对羟基山椒素成分进行准确的定性和定量分析，但存在仪器昂贵体积大，检测时间较长，操作程序繁琐等不足，使该方法难以实现现场快速检测。申请号201210410462.1，名称为“一种花椒麻味素类物质含量快速检测方法”的专利申请，通过提取总酰胺浸膏，建立了甲醛滴定法检测羟基山椒素类物质的含量。申请号201410573260.8，名称为“花椒油中酰胺类物质含量的测定方法”的专利申请，根据标准曲线和溶液的紫外吸光度得到花椒油中酰胺类物质的含量。但这些方法的检测结果极易受花椒中多酚、色素等其他物质的干扰，容易出现假阳性结果，更无法实现准确地定量分析。因此，建立一种快速、准确识别羟基山椒素的检测方法用于花椒的质量监控及品质分级有重要意义。

拉曼光谱技术是一种高效的光谱检测技术，而表面增强拉曼散射光谱(SurfaceEnhancedRaman Scattering，SERS)技术是纳米材料与拉曼光谱技术相结合的有效产物，能够可靠地提供分子的结构信息，从而可以快速得到被测样品的成分信息，具有分析速度快，操作简单，灵敏度高等优点，适合现场快速鉴别及检测，在食品检测领域的应用越来越广泛。比如，有文献公开以银纳米或金纳米溶胶为增强基底，建立了柑桔中三唑磷农药残留的快速检测方法。还有有文献采用银纳米棒阵列为基底，利用SERS技术对食用油中的辣椒碱进行定性和定量分析。

但是目前，基于SERS技术快速检测花椒中羟基山椒素的研究尚未见报道。因此，设计一种操作简便、分析快速、能够反映羟基山椒素结构信息且能准确定量的SERS检测方法成为亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有检测羟基山椒素技术中存在的不足，构造了针对羟基山椒素的SERS基底材料，并依此建立了一种基于SERS技术的羟基山椒素快速检测方法，实现对羟基山椒素的快速定性判别和定量检测。为实现上述目的，本发明采用以下技术手段：

本发明提供一种基于表面增强拉曼光谱的羟基山椒素快速检测方法，具体包括以下步骤：

(1)绘制羟基山椒素标准曲线：

首先制备不同浓度的羟基-α-山椒素标准溶液，然后分别取不同浓度的羟基-α-山椒素标准溶液，体积均相同，记为V₁；然后取与羟基-α-山椒素标准溶液相同数量的SERS基底材料的悬液，体积均相同，记为V₂；再取相同数量的无机盐凝聚剂，体积均相同，记为V₃；