[发明专利]一种富含乳糖的生物质联产beta-半乳糖苷酶酶制剂和乙醇产品的集成方法

权利要求书

1.一种富含乳糖的生物质联产beta-半乳糖苷酶酶制剂和乙醇产品的集成方法，其特征是包括如下步骤：

1)富含乳糖的生物质发酵联产胞内酶beta-半乳糖苷酶和乙醇；

2)利用蒸馏所得的乙醇溶液透性化处理酵母全细胞；

3)喷雾干燥透性化酵母细胞悬浮液获得beta-半乳糖苷酶酶制剂

4)利用透性化处理液进一步蒸馏获得所需浓度的乙醇产品。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤1)的方法是：将乳酸克鲁维酵母单克隆接种到种子液培养基中制备酵母种子液，然后向富含乳糖的生物质培养基中加入体积比为1～10％酵母种子液，在温度为16～37℃，搅拌转速为200～500rpm，pH值为8.5～10的条件下发酵制备，发酵时间为8～48h，获得酵母全细胞发酵液。

3.如权利要求2所述的方法，其特征是所述的种子液培养基是每升培养基中含有1～30g酵母膏，1～30g蛋白胨和1～10g氯化钠；所述的富含乳糖的生物质选自乳糖、乳清或乳清粉；所述的培养基是每升培养基中含有1～100g富含乳糖的生物质，1～30g酵母膏和1～30g蛋白胨；所述的酵母全细胞含有beta-半乳糖苷酶胞内酶；所述的发酵液中还含有浓度为5～20g/L的乙醇。

4.如权利要求2所述的方法，其特征是所述的乳酸克鲁维酵母购置于中国工业微生物菌种保藏管理中心，编号为CICC1773。

5.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤2)的方法是：将上述所述的发酵液进行离心分离，获得发酵上清液和酵母全细胞沉淀，利用旋转蒸发仪在35～45℃，0.07～0.08MPa条件下蒸馏发酵上清液获得浓度为体积比37％～50％的蒸馏乙醇溶液；酵母全细胞沉淀用于透性化处理；采用浓度为体积比20％～50％的蒸馏乙醇溶液透性化处理浓度为1～100g/L的酵母全细胞，透性化处理温度为0～37℃，透性化处理时间为5s～5min，离心分离获得乙醇处理液和透性化酵母细胞，向透性化酵母细胞加入pH值为4～10的50mM磷酸钠缓冲液使透性化酵母细胞质量比为1％～10％，经洗涤再离心除去上清液，获得透性化酵母细胞。

6.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤3)的方式是：取一定质量的透性化细胞(细胞干重)，加入相应体积的50mM pH 7.0磷酸钠缓冲液使固形物含量为2～3％，摇匀，制得透性细胞悬浮液，通过喷雾干燥可获得单位酶活为2.6～5.2U/mg，含水率为5.9～8.7％的beta-半乳糖苷酶酶制剂。

7.如权利要求6所述的方法，其特征是喷雾干燥条件是：进口温度180～220℃，雾化压力2.5～3.5bar，进料速度450～500mL/h，鼓风速率4～5m/s。

8.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤4)的方式是：将透性化酵母细胞离心分离获得乙醇处理液，利用旋转蒸发仪在35～45℃，0.07～0.08MPa条件下蒸馏乙醇处理液获得浓度为体积比75～95％的蒸馏乙醇产品。

9.如权利要求5或8所述的方法，其特征是所述的离心条为离心转速1000～15000rpm，离心时间1～20min。