[发明专利]一种TMB显色体系及其检测还原性物质的应用有效
申请号: | 202010114473.X | 申请日: | 2020-02-25 |
公开(公告)号: | CN111189823B | 公开(公告)日: | 2022-02-25 |
发明(设计)人: | 刘伟;张柳;侯越;吕聪聪 | 申请(专利权)人: | 陕西师范大学 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/33 |
代理公司: | 西安永生专利代理有限责任公司 61201 | 代理人: | 高雪霞 |
地址: | 710062 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 tmb 显色 体系 及其 检测 原性 物质 应用 | ||
1.TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,所述的还原性物质为谷胱甘肽、抗坏血酸、半胱氨酸中任意一种;TMB显色体系,其特征在于:所述TMB显色体系由pH值为3.0~7.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液、0.08~1.5 mg/mL的Fe配合物水溶液、0.4~2.0 mmol/L的TMB溶液组成;
上述Fe配合物为是式A所示的Fe(Ⅲ)的吡啶配合物或式B所示的Fe(Ⅲ)的邻菲啰啉配合物:
。
2.根据权利要求1所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,其特征在于:将Fe配合物水溶液加入到醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,然后加入TMB溶液,再加入不同浓度的还原性物质标准样品溶液,室温孵育5~20分钟后,通过紫外吸收光谱仪检测体系在652 nm处的吸光度;其中,还原性物质为谷胱甘肽或半胱氨酸时,构建吸光度变化值与还原性物质浓度的线性关系,还原性物质为抗坏血酸时,构建吸光度与还原性物质浓度的线性关系;利用此线性关系检测未知浓度的还原性物质。
3.根据权利要求2所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,其特征在于:所述醋酸-醋酸钠缓冲溶液与TMB溶液、Fe配合物水溶液的体积比为20:1:5~20:1:10。
4.根据权利要求1所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,其特征在于:所述Fe配合物水溶液的浓度为0.8~1.5 mg/mL。
5.根据权利要求1所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,其特征在于:所述TMB溶液的浓度为0.8~1.2 mmol/L。
6.根据权利要求1所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,其特征在于:所述TMB溶液是将3,3',5,5'-四甲基联苯胺用乙醇溶解后加去离子水制得。
7.根据权利要求1所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,其特征在于:所述醋酸-醋酸钠缓冲溶液的pH值为4.0~6.0。
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