[发明专利]转基因玉米BBHTL8-1外源插入片段旁侧序列及其应用

说明书

本发明公开了一种转基因抗虫耐除草剂玉米BBHTL8‑1外源插入片段旁侧序列及其应用。所述旁侧序列的核苷酸序列分别如序列表SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。本发明还提供了用于检测3’端旁侧序列的引物对。本发明的转基因抗虫耐除草剂品质改良玉米BBHTL8‑1外源插入片段旁侧序列的鉴定适用于玉米BBHTL8‑1包括亲本、杂交种以及后代相关材料，包括植株、组织、种子及相关制品的检测。

技术领域

本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种转基因抗虫耐除草剂玉米BBHTL8-1外源插入片段旁侧序列及其应用。

背景技术

玉米在我国重要的粮食作物，也是重要的饲料及工业原料，在保障国家粮食安全和国民经济发展中发挥重要作用。玉米螟和双斑萤叶甲每年都对我国的玉米生产造成重大损失。杂草也对我国玉米生产造成严重危害，一般年份造成10-30%的减产，严重可达50%以上，随着人工成本的增加，依靠人工除草大大增加生产成本。为防治害虫和降低杂草发生，农民常大量使用高毒化学农药进行防治，导致玉米农药残留严重，且喷药过程容易引起中毒事件发生，严重危害人民健康。抗虫和抗除草剂玉米的研制对于我国玉米产业的发展具有重要意义。

转基因技术为玉米的遗传改良提供了一条新的分子育种途径。利用转基因技术培育的抗虫、抗除草剂转基因作物是农业害虫控制和杂草防除的有效手段，可有效减少农民对化学杀虫剂的依赖，降低人工成本，提高玉米产量和品质，对于保护生态环境和生物多样性具有重要意义。Bt基因Cry1Ab主要应用于针对鳞翅目害虫玉米螟和棉铃虫的抗虫基因。孟山都公司的MON810、杜邦公司的TC1507、先正达公司的Bt11、Bt176、先锋公司的DP4114等转基因品种含有Cry1Ab，均已实现了商业化种植推广。Cry3Bb主要针对玉米双斑萤叶甲等鞘翅目类昆虫，孟山都公司的MON863、MON88017中的Cry3Bb1可以抗玉米根虫鞘翅目害虫。草甘膦（Glyphosate）是一种内吸性、广谱性、施用于叶面的有机膦类除草剂，1971年由孟山都公司成功开发，是全球销售最好的除草剂，具有高效、低毒、易降解等特点。其可以竞争性抑制植物和细菌的莽草酸途径中5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)的活性。孟山都公司的NK603、MON87427将具有抗草甘膦除草剂能力的cp4epsps基因转入农作物中，使这些作物具有抗草甘膦能力，并得到了大规模的商业化应用。

维生素E（生育酚）具有重要的抗氧化功能，是动物和人体必须的一种脂溶性维生素，包括8种生育酚，即α、β、γ、δ-生育酚和α、β、γ、δ-三烯生育酚，玉米中以α、β、γ、δ-生育酚为主，其中α-生育酚活性最高，γ-生育酚在玉米中含量最高，但其活性只有α-生育酚的1/10。ZmHPT可以提高植物体内的维生素E总含量。ZmTMT可以把低活性的γ-生育酚转化为高活性的α-生育酚，两个基因的结合可以显著提高玉米的α-生育酚含量。国际农业生物技术应用服务组织发布的2018年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势表明，2018年转基因作物继续保持高应用率，全球种植面积达到1.917亿公顷。具有复合抗虫性状的转基因作物种植面积占全球种植面积的42%。在美国，复合性状的转基因玉米的种植面积占玉米总种植面积的76%。复合性状转基因作物具有成本低、效率高、管理方便、投入较少等优点，将会得到农民的更多的应用和青睐。