[发明专利]一种酶催化剂及其制备方法与在生产3-氨基丙酸中的应用在审
申请号: | 202010116019.8 | 申请日: | 2020-02-25 |
公开(公告)号: | CN111304184A | 公开(公告)日: | 2020-06-19 |
发明(设计)人: | 陈可泉;冯娇;王昕 | 申请(专利权)人: | 南京凯诺生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12P13/04 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 胡建华 |
地址: | 210008 江苏省南京市江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 催化剂 及其 制备 方法 生产 氨基 丙酸 中的 应用 | ||
1.一种酶催化剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将L-天冬氨酸脱羧酶菌株培养,离心,得到菌体;
(2)用水将步骤(1)得到的菌体重悬,得到重悬液;向重悬液中加入表面活性剂,搅拌,离心,得到上清液;
(3)向步骤(2)得到的上清液中加入金属离子,混合,再加入配体溶液,搅拌,洗涤,离心,所得沉淀物即为酶催化剂。
2.根据权利要求1所述的酶催化剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,用水重悬菌体至1~10OD。
3.根据权利要求1所述的酶催化剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述的表面活性剂为吐温类表面活性剂、司班类表面活性剂、曲拉通X-100、甜菜碱型表面活性剂中的任意一种;重悬液与表面活性剂的体积比为1:0.05~0.25。
4.根据权利要求1所述的酶催化剂的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的离子为二价金属离子;离子溶液的浓度为10~50mmol/L,溶剂为水;上清液与离子溶液的体积比为1.5~3:1。
5.根据权利要求1所述的酶催化剂的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的配体为咪唑或咪唑衍生物;配体溶液的浓度为20~145mmol/L,溶剂为水;配体溶液与离子溶液的体积比为1:1~2。
6.权利要求1~5中任意一项所述方法制备得到的酶催化剂。
7.权利要求6所述酶催化剂在产3-氨基丙酸中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,包括如下步骤:向PBS缓冲液中加入权利6所述的酶催化剂,反应。
9.根据权利要求8所述的反应,其特征在于,控制酶催化剂的用量,使酶催化剂中L-天冬氨酸脱羧酶的浓度为2mg/L。
10.根据权利要求8所述的反应,其特征在于,所述的反应为在30~40℃下50~300rpm振荡反应8~12h。
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