[发明专利]一种精子冷冻载体系统以及超快速冷冻精子方法

权利要求书

1.精子冷冻载体系统，其特征在于：它包括内芯麦管(1),外套麦管(2)，近端二阶插头(3)；

内芯麦管(1)远端开设置有一沿其长度方向布置且用于放置微量精子液滴的凹槽(11)；

内芯麦管(1)的近端插于近端二阶插头(3)中的小插头(31)，外套麦管(2)套设于内芯麦管外，外套麦管(2)的近端插于近端二阶插头(3)中的大插头(32)，外套麦管(2)的远端封口。

2.根据权利要求1所述的精子冷冻载体系统，其特征在于：所述内芯麦管的长度为5-10cm，内芯麦中凹槽的长度为4-9cm。

3.根据权利要求1所述的精子冷冻载体系统，其特征在于：所述内芯麦管为0.25ml麦管；所述外套麦管为0.5ml麦管。

4.一种超快速冷冻精子方法，其特征在于：它包括如下步骤：

S1精液预处理：将精子悬液中加入精子冷冻液，之后室温平衡；

S2精液装载:将内芯麦管近端插上近端二阶插头，将S1中准备的精子滴在内芯麦管远端的凹槽中，之后在内芯麦管外套上外套麦管，外套麦管近端插于近端二阶插头，外套麦管的远端通过远端插头或热封方式封口，从而形成闭合套管式麦管系统；

S3精液冷冻：将闭合套管式麦管系统放置于装有液氮的精子冷冻泡沫塑料箱中，其中精子冷冻泡沫塑料箱内设有浮在液氮液面的泡沫塑料块，闭合套管式麦管系统的外套麦管的远端封口和近端二阶插头架设于泡沫塑料块，使得内芯麦管投影不受遮挡暴露在液氮蒸汽中熏蒸；液氮蒸汽熏蒸一定时间后，将闭合套管式麦管系统平行快速浸入液氮中进行冷冻,之后将闭合套管式麦管系统转移到液氮罐中保存。

5.根据权利要求4所述的一种超快速冷冻精子方法，其特征在于：

S1中的具体参数为：在洗涤回收后的精子悬液中，按悬液与冷冻液体积比1:1或者2:1比例逐滴加入精子冷冻液，边加边混匀，每滴间隔30秒；混合均匀后，室温平衡10分钟。

6.根据权利要求4所述的一种超快速冷冻精子方法，其特征在于：

S2中，精子采用微滴方式滴于凹槽上，每滴2～10μl，每滴间隔2mm，装载10～20滴。

7.根据权利要求4所述的一种超快速冷冻精子方法，其特征在于：

S3中，泡沫塑料块的高度为1～10cm，液氮蒸汽熏蒸45s～30min。

8.根据权利要求4所述的一种超快速冷冻精子方法，其特征在于：

S3中，闭合套管式麦管系统在液氮蒸汽中熏蒸特定时间后，直接浸入液氮中。

9.根据权利要求4～8中任意一项所述的一种超快速冷冻精子方法，其特征在于：

它还包括

S4精液解冻：从液氮罐中取出闭合套管式麦管系统，室温空气解冻或特定温度水浴解冻至液滴完全融化后，取出闭合套管式麦管系统中的内芯麦管，将内芯麦管竖直插入1.5ml无菌小管底部，轻轻快速撞击管底，让精子液滴从内芯麦管上滑落到无菌小管中；分3次加入总量为20～40μl培养液，每次间隔30秒。解冻后的标本，37℃复温15min后使用。