[发明专利]一种高产、富硒蛹虫草的培养方法及其培养基

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种高产、富硒蛹虫草的培养方法，包括如下步骤：S1、平板培养；S2、液体发酵培养；S3、菌丝培养；S4、转色培养；S5、子座培养；S6、子实体培养。本发明还提供了一种用于高产、富硒蛹虫草的液体发酵培养基及固体培养基。本发明提高了蛹虫草的产量、硒含量和腺苷含量。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种高产、富硒蛹虫草的培养方法及其培养基。

背景技术

蛹虫草[Cordyceps militaris]也称北冬虫夏草、北虫草，属真菌门，子囊菌亚门，核菌纲，麦角菌目，麦角菌科，虫草属，与冬虫夏草同属异种，是虫草属的模式种。大量研究表明，蛹虫草的药理作用与冬虫夏草极为相似，其药用成分虫草酸、虫草多糖、虫草素含量及SOD活性等均高于冬虫夏草，具有抗肿瘤、抗疲劳、降血糖、抗菌消炎、提高免疫力、补肺阴、补肾阳、治疗肾虚等功效，其对于老年人慢性支气管炎、肺原性心脏病都有显著的疗效。

蛹虫草的寄主范围相对较广，但专一性不强，主要寄生在鳞翅目、双翅目及鞘翅目等昆虫的幼虫、成虫和蛹上，以鳞翅目为主，分为3目11科19种。蛹虫草主要分布于热带、亚热带地区及寒、温气候带。国外主要在欧洲的法国、德国、英国以及北美洲的美国、加拿大等地分布较多；国内自然资源丰富，在辽宁、陕西、山西、安徽、四川、贵州、云南、湖北、湖南、吉林、河南、广东、广西、山东、江苏、甘肃、福建等省区均有发现。蛹虫草主要生长在阳光充足、湿度较大的中山和浅山区，子座通常在每年的夏末秋初进行分化。

硒是一种人体内不可缺少的微量元素，能够清除人体内过多的氧自由基，有效的防止细胞膜脂质过氧化的破坏硒元素是人体内所必须的一种微量元素，具有抗氧化、抗衰老的生理功能。基于蛹虫草的药用价值及硒对人体的重要性，人工培养富硒蛹虫草具有极其重要的意义。

申请公布日为2018年7月20日，申请公布号为CN108300667A的中国发明专利申请，其公开了一种富硒蛹虫草发酵培养的方法，包括富硒发酵蛹虫草菌丝的培养基pH为8时，向培养基中添加无机硒，以及磷酸盐的步骤；条件是，无机硒和磷酸盐不同时添加。该发明通过有效的施用磷酸盐、硫酸盐规避蛹虫草发酵培养中的不利影响，提高富集效率和保证产品的安全性。

授权公告日为2019年7月26日，授权公告号为CN106544277B的中国发明专利，其公开了一种制备蛹虫草子实体产品的方法，包括如下步骤：(a1)采用种子强化培养基培养蛹虫草菌株，得到种子强化培养物；(a2)将步骤(a1)得到的种子强化培养物接种至液体种子培养基中进行培养，得到液体种子；(a3)将步骤(a2)得到的液体种子接种至子实体富硒培养基中进行培养，得到蛹虫草子实体。该发明利用富硒酵母粉作为蛹虫草菌株子实体培养有机氮源的同时提供硒源，提高硒的利用率与吸收率，大大增强子实体当中的硒含量。

申请公布日为2018年12月7日，申请公布号为CN108934781A的中国发明专利申请，其公开了一种富硒蛹虫草的高产培养基，包括：蚕蛹、葡萄糖、荞麦麸、蛋白胨、磷酸盐、无机硒、富硒酒糟、富硒酵母、复合维生素B、水，该发明提高虫草对硒元素的吸收和存活率高。

上述公开的技术方案都具有一定的提升蛹虫草中硒含量的效果，但其硒含量及产量并不理想。

发明内容

本发明一方面要解决的技术问题是提供一种高产、富硒蛹虫草的培养方法，用以提高蛹虫草的产量、硒含量及腺苷含量。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：

一种高产、富硒蛹虫草的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、平板培养：将蛹虫草菌株接种至PDA培养基上，在18～25℃的条件下培养12～18天；

S2、液体发酵培养：将步骤S1中长势良好的菌种采用直径为1cm的打孔器接种入液体发酵培养基中，在20～28℃、120～180r/min的条件下恒温摇床培养7～15天，得液体菌种；