[发明专利]sll0528基因在提高集胞藻PCC6803氧化胁迫耐受性中的应用

权利要求书

1.sll0528基因在提高集胞藻PCC6803氧化胁迫耐受性中的应用，其特征在于：过表达sll0528基因提高集胞藻PCC6803氧化胁迫耐受性，敲除sll0528基因降低集胞藻PCC6803氧化胁迫耐受性；

所述的氧化胁迫包括甲萘醌胁迫或过氧化氢胁迫；

所述的sll0528基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：

所述的sll0528基因在构建氧化胁迫耐受性显著提高的集胞藻PCC6803藻株中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

所述的氧化胁迫耐受性显著提高的集胞藻PCC6803藻株，其过表达的基因sll0528由光诱导型强启动子psbA2调控，启动子psbA2的核苷酸序列或基因序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：

所述的氧化胁迫耐受性显著提高的集胞藻PCC6803藻株的构建方法，包括如下步骤：

（1）扩增目的片段：以野生型集胞藻PCC6803基因组为模板，以序列表中SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4作为目的片段slr2030的上、下游引物，SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8为psbA2启动子的上、下游引物，SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10为sll0528的上、下游引物，SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12为slr2031的上、下游引物，扩增得到slr2030、psbA2、sll0528和slr2031；以质粒pET-30b为模板，以SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6作为引物，扩增得到卡那霉素抗性基因km^r；

（2）构建重组质粒：以pUC118作为质粒载体，用限制性内切酶Hind Ⅲ和PstⅠ将目的片段slr2030和质粒pUC118酶切，再用T4 DNA酶将酶切好的slr2030连接到pUC118上；同样地，用限制性内切酶PstⅠ和PstⅠ，PstⅠ和XbaⅠ，XbaⅠ和SmaⅠ，SmaⅠ和EcoRⅠ依次剪切获得目的片段km^r，psbA2启动子，sll0528，slr2031，并将其用T4 DNA酶依次连接插入载体质粒pUC118中，构建得到同源重组双交换质粒P3031；

（3）构建过表达菌株：将同源重组双交换质粒P3031通过自然转化的方法转入集胞藻PCC6803野生型中，使带强启动子psbA2、sll0528和km^r基因的目的片段通过同源双交换的方式插入集胞藻PCC6803的基因组，构建sll0528过表达菌株，命名为Osll0528。