[发明专利]一种利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法

权利要求书

1.一种利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将磷脂酶D加入到PBS缓冲液中，得到蛋白稀释液；将蛋白稀释液与载体混合，离心，所得沉淀即为载体固载的磷脂酶D；

(2)将步骤(1)得到的载体固载的磷脂酶D装填到两端用微滤膜封口的微通道管道内，即为填充载体固载磷脂酶D的微反应器；

(3)将有机相、磷脂酰胆碱和乙醇胺制备成均相溶液A；

(4)将水相和步骤(3)制得的均相溶液A分别同时泵入微通道反应装置中的微混合器中，混合后通入步骤(2)制得的微反应器中反应，收集微反应器流出液，得到产物磷脂酰乙醇胺。

2.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(1)中，蛋白稀释液中磷脂酶D的浓度为0.08～0.15g/L。

3.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的载体为石墨烯、碳纳米管、碳纳米片中的任意一种；蛋白稀释液与载体的体积质量比为27～35mL/g。

4.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(2)中，微滤膜的孔径为0.22μm；载体固载的磷脂酶D与微通道的质量体积比为0.01～0.02mg/mL。

5.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的有机相为氯仿、三氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯和醋酸丁酯中的任意一种；乙醇胺的pH值为7.0；磷脂酰胆碱和乙醇胺的摩尔浓度比为5～20mmol/L/2.5～10mmol/L。

6.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的水相为去离子水和缓冲液中的任意一种。

7.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(4)中，控制有机相与水相的体积比为1:1～3:1。

8.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(4)中，控制水相与均相溶液A的总体积，使磷脂酶D的浓度为0.4～0.6U/mL。

9.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的反应为在pH值为6～7，30～50℃下反应0.8～1.5h。

10.根据权利要求1所述的利用微通道酶催化产磷脂酰乙醇胺的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的微通道反应装置包括第一进料泵、第二进料泵、微混合器、微反应器和接收器；其中，第一进料泵和第二进料泵通过管道以并联的方式连接到微混合器上，微混合器依次与微反应器、接收器串联，所述的连接为通过管道连接。