[发明专利]紫云英LHY基因及其应用有效
申请号: | 202010120702.9 | 申请日: | 2020-02-26 |
公开(公告)号: | CN111171127B | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 张贤;王建红;曹凯;徐静;斯林林 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10;A01H6/20;A01H6/54 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 紫云英 lhy 基因 及其 应用 | ||
本发明提供紫云英LHY基因及其应用。紫云英LHY基因及其编码蛋白的序列见SEQ ID NO:1和2。本发明首次从紫云英中克隆得到LHY基因,并通过农杆菌介导的遗传转化方法,在拟南芥中验证了LHY基因具有调控植物开花的功能,具体为延迟植株开花。转LHY基因的拟南芥株系出现抽薹提前,开花提前,抽薹天数比野生型平均晚18.36天,开花天数比野生型平均晚20.72天。这表明紫云英LHY基因与成花关系密切,其具有调节开花时间的功能。将该基因应用于植物性状改良,具有良好的应用前景。本发明提供的LHY基因及其编码蛋白为培育植物新品种提供了宝贵资源。
技术领域
本发明涉及基因工程和植物遗传育种领域,具体地说,涉及紫云英LHY基因及其应用。
背景技术
紫云英(Astragalus sinicus L.)是豆科,黄耆属二年生草本植物,主要分布于中国长江流域,是重要的蜜源植物。紫云英对土壤资源的可持续利用,具有重要意义。
成花是植物从营养生长向生殖生长的关键转换,同时也是是实现世代交替的中心环节,在很大程度上决定了植物繁殖的成功与否。紫云英按开花早晚可分特早花型、早花型、中花型和晚花型,开花时间直接决定了有效生长季的长短。作为绿肥,紫云英的种植和收获时间取决于主作物,保证紫云英产量的同时还要与主作物的生育期相协调。在合适的时间促使或避免开花,根据当地的耕作制度选育花期适当的品种是重要的育种目标。因此,成花基因研究对紫云英生长发育及遗传改良具有重要意义。但对于紫云英成花机制的研究,以及开花相关基因在此过程中的作用尚不清楚。
发明内容
本发明的目的是提供紫云英LHY基因及其应用。
为了实现本发明目的,第一方面,本发明提供紫云英LHY基因,LHY基因为编码如下蛋白质(a)或(b)的基因:
(a)由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)SEQ ID NO:2所示序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等功能的由(a)衍生的蛋白质。
本发明利用RACE技术获得LHY基因的全长cDNA序列大小为2865bp(SEQ ID NO:1),含有一个2259bp的开放阅读框,5’和3’非编码区的长度分别为407bp和199bp。PolyA尾巴信号肽区域位于2854-2859bp处。
第二方面,本发明提供含有所述LHY基因的生物材料,所述生物材料包括但不限于重组DNA、表达盒、转座子、质粒载体、噬菌体载体、病毒载体或工程菌或非可再生的植物部分。
第三方面,本发明提供所述LHY基因或含有该基因的生物材料在调控植物开花时间中的应用。
所述调控是指延迟开花时间。
前述应用包括:
1)使植物包含LHY基因;或者,
2)使植物过表达LHY基因。
所述应用包括但不限于转基因、杂交、回交、自交或无性繁殖。
可选地,过表达LHY基因的方法选自以下1)~4),或任选的组合:
1)通过向植物中导入具有LHY基因的质粒;
2)通过增加植物染色体上LHY基因的拷贝数;
3)通过将强启动子与LHY基因可操作地连接;
4)通过导入增强子。
本发明中,所述植物为拟南芥、紫云英。
进一步地,所述应用包括利用Ti质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、基因枪、电导或农杆菌介导等方法将包含LHY基因的重组表达载体导入植物,获得转基因植株。
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