[发明专利]一种检测样本中目标IgM抗体的方法有效

专利信息
申请号: 202010123237.4 申请日: 2017-11-03
公开(公告)号: CN111398580B 公开(公告)日: 2023-06-13
发明(设计)人: 赵文雅;刘宇卉;李临 申请(专利权)人: 科美诊断技术股份有限公司
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569
代理公司: 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 代理人: 刘建军;吴大建
地址: 100094 北京市海淀区永丰基*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 样本 目标 igm 抗体 方法
【说明书】:

本发明涉及一种检测样本中目标IgM抗体的方法,其包括以下步骤:首先制备由C1q‑供体‑IgM抗体‑已知抗原‑受体形成的复合物;然后利用能量或者活性化合物处理上述复合物,激发供体产生单线态氧,受体与单线态氧反应生成可检测的化学发光信号;最后分析所述化学发光信号情况,判断待测样本中是否存在目标IgM抗体以及目标IgM抗体的含量。上述检测样本中目标IgM抗体的方法解决了非特异性IgM抗体对检测的影响。

本申请是申请日为2017年11月3日,申请号为201711069928.5,发明名称为“一种检测样本中目标IgM抗体的均相免疫检测试剂盒及其使用方法和应用”的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于生物医学检测技术领域,具体涉及一种检测样本中目标IgM抗体的均相免疫检测试剂盒及其使用方法和应用。

背景技术

IgM类抗体的检测在医学检验中具有重要的意义。病原体初次感染机体,最先产生的抗体总是IgM抗体,随着机体免疫应答的进程,发生抗体类别转换,产生IgG、IgM或IgA抗体。因而,在感染性疾病的诊断中,IgM抗体检测呈阳性是现症感染的标志。

目前常用的IgM抗体检测的方法有捕获法,其是在固相载体上固相包被抗人IgM(μ链)抗体,血清/血浆样本经过与固相载体反应后,样本中的所有IgM抗体被捕获到固相载体上,此时经过洗涤,可以去除特异性IgG抗体的干扰,加入标记的抗原,经反应产生可以检测的信号。该方法存在以下两个弊端:一是抗人IgM抗体作为捕获抗体,无法区分特异性IgM抗体和非特异性IgM抗体,当特异性IgM抗体浓度较低而非特异性IgM抗体浓度特别高时,可能会存在特异性IgM抗体被洗涤而除去,造成假阴性的结果。二是检测过程需经过两步孵育和洗涤,在洗涤的过程中非常依赖洗涤设备的洗涤效率,容易出现重复性差等问题,两次孵育步骤繁琐,耗时长,降低了工作效率。

另外一种IgM抗体的检测方法使用均相的一步法检测,在检测过程中加入去除特异性IgG干扰的生物活性物质,解决了捕获法需要两步洗涤效率低,耗时长的问题。但是该方法加入了一种新的生物活性物质,反应系统中存在过多的蛋白组分,有造成假阳性的可能。另外,均相反应系统中非特异性IgM抗体也会消耗大量的抗人IgM抗体,当特异性IgM抗体浓度较低而非特异性IgM抗体浓度特别高时,也有造成假阴性的可能。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足提供了一种检测样本中目标IgM抗体的试剂盒和方法。利用该试剂盒中含有的补体C1q代替抗人IgM抗体作为捕获物或示踪物,进而检测目标IgM抗体的方法,由于非特异性IgM抗体不与已知抗原发生反应,呈游离状态,因而不能与补体C1q结合,去除了非特异性IgM对检测的干扰。

为此,本发明第一方面提供了一种检测样本中目标IgM抗体的均相免疫检测试剂盒,其包括:

试剂a,其包括已知抗原,所述已知抗原能够与待检样本中的目标IgM抗体特异性结合形成第一复合物;

试剂b,其包括补体C1q,所述补体C1q能够与所述第一复合物特异性结合形成第二复合物,且所述补体C1q不能与游离的IgM抗体结合;

其中,所述已知抗原和补体C1q中的任一种与受体相连;所述受体能够与其接收到的单线态氧反应产生可检测的化学发光信号;

试剂c,其包括供体,所述供体能够在激发状态生成单线态氧。

在本发明的另一些实施方式中,所述试剂盒包括:

试剂a,其包括已知抗原,所述已知抗原能够与待测样本中的目标IgM抗体特异性结合形成第一复合物;

试剂b,其包括补体C1q,所述补体C1q能够与所述第一复合物特异性结合形成第二复合物,且所述补体C1q不能与游离的IgM抗体结合;

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