[发明专利]DNA甲基化标志物LPCAT1在制备诊断PCOS试剂盒中的应用

说明书

本发明提供了一种DNA甲基化标志物LPCAT1在制备诊断PCOS试剂盒中的应用，属于生物医药技术领域。本发明首次发现相对于正常组织，LPCAT1基因的表达水平和启动子区DNA甲基化水平在PCOS患者卵巢颗粒细胞中呈现显著性差异，可作为PCOS相关的生物标志物，开发为PCOS诊断检测试剂盒；本发明还通过检测卵巢颗粒细胞样品中的，LPCAT1基因的表达水平和启动子区DNA甲基化水平，可以快速、准确及清楚的确定PCOS的发生。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，涉及一种DNA甲基化标志物LPCAT1在制备诊断多囊卵巢综合征(PCOS)试剂盒中的应用。具体涉及LPCAT1基因的表达水平及其启动子区DNA甲基化在用于制备研究或检测多囊卵巢综合征的试剂盒中的用途，还提供了用于检测LPCAT1基因的表达水平及其启动子区DNA甲基化的探针引物。

背景技术

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄女性最常见的内分泌疾病，其症状为高雄激素血症，慢性无排卵和多囊卵巢。它也被认为是女性身体机能障碍的常见原因，常见的临床表现包括多毛症、痤疮、肥胖、月经失调和不孕。它也被认为增加了包括血脂异常、心血管疾病、II型糖尿病、高胰岛素血症和子宫内膜癌等代谢相关疾病的患病风险。鉴于PCOS呈现出的复杂性和特异性，临床上对其具体发病原因及发病的机制尚缺乏明确的结论和定义。从病因学到临床表现和长期预后中的异质性是PCOS固有的特征，目前普遍观点认为，PCOS是由外部环境因素和遗传因素共同导致的一种涉及多组织多器官的系统性代谢综合征，其相关机制一直是研究的热点和难点。

随着测序技术的飞速发展，精准医学取得了巨大的进步。基于高通量测序的全基因组范围系统性的研究结果表明：表观遗传和转录调控参与了多囊卵巢综合征的发病机制。在伴随有代谢紊乱的PCOS患者中，卵巢、卵巢颗粒细胞和脂肪组织的全基因组DNA甲基化和转录模式发生了显著变化，这一证据表明，甲基化作为表观遗传调控的重要组成部分之一参与PCOS发病机制，这可能是由不良的宫内环境或后天的环境因素如饮食和肥胖引起的。DNA甲基化过程中并不伴随基因序列的改变，但其能通过改变染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式控制基因的表达。

传统的多囊卵巢综合征诊断主要依靠临床表现、雄激素水平检测和卵巢B超检测。根据鹿特丹ESHRE/ASRM(2003)标准，须满足下述三项中的两项：月经稀发；临床或者生化雄激素过多症；双侧或单侧卵巢多囊样改变和/或体积增大。但上述技术不易检测到症状不明显的多囊卵巢综合征患者，随着生物技术的发展，分子生物标志物为PCOS的诊断提供了一种新的途径。目前关于PCOS的分子诊断标志物有代谢产物、卵泡数目、SNP标记等。关于LPCAT1基因启动子区DNA甲基化及其表达水平可作为PCOS诊断生物标志物的应用尚未见报道。