[发明专利]妊娠相关蛋白A磁微粒化学发光检测试剂盒及其使用方法

说明书

本发明公开了医疗器械生物类免疫体外诊断相关技术领域的妊娠相关蛋白A磁微粒化学发光检测试剂盒及其使用方法；包括相互独立包装的荧光素标记的PAPP‑A抗体的溶液、碱性磷酸酶标记的PAPP‑A抗体的溶液、包被荧光素抗体的磁微粒悬浮液、PAPP‑A校准品、发光底物的溶液；本发明将磁微粒技术和化学发光技术相结合，提供了一种趋于均相的反应体系；能够以更高准确度、特异性、精密度和更低成本对妊娠相关蛋白A(PAPP‑A)进行定量检测。

技术领域

本发明涉及医疗器械生物类免疫体外诊断相关技术领域，特别涉及妊娠相关蛋白A磁微粒化学发光检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

血清妊娠相关血浆蛋白A(PAPA-A)为一种大分子糖蛋白，分子量为200kDa，该蛋白为锌肽酶超家族成员。PAPP-A首先在妊娠妇女的血清中出现，在妊娠期间稳定性升高，直至足月。PAPP-A由滋养的两个亚基一起一以2：2异四倍体复合物的形式在血中循环。许多研究证实，在妊娠前三个月(11～14周)，PAPP～P作为可选血清标志物，以及颈半透明度(NT)的超物的联合检测出患唐氏综合症胎儿的高危孕妇。应用该标志物的联合检测，其检出率可达70％(仅采用血清标志物)和90％(联合颈半透明度NT检测)，假阳性为5％。怀有唐氏综合症胎儿的孕妇血清PAAA～A浓度中值低于正常孕妇。根据孕妇的年龄，可采用特定算法(例如似然比等)计算患唐氏综合症的风险。

目前妊娠相关蛋白A检测方法多采用免疫学方法。免疫学检测技术利用抗原、抗体特异性反应原理检测机体内待测物质的技术。放射免疫检测、荧光免疫检测、酶联免疫检测及化学发光检测技术逐渐发展成熟，并逐步取代了传统的免疫沉淀、免疫凝聚等技术，免疫学检测技术的发展使临床检测检验发生了巨大的变化：可检测项目剧增、检测灵敏度和特异度更高，自动化程度增加。尤其是后期发展的化学发光免疫检测技术进一步提高了检测的灵敏度和特异度等检测性能，为疾病的定量检测、诊断、治疗提供了直观的资料。

妊娠相关蛋白A是医院开展的重要的检测项目，对计算患唐氏综合症的风险诊断具有无可替代的参考作用。目前我国批准上市的妊娠相关蛋白A检测试剂多为国产，采用的检测方法学多为酶免和化学发光。

因此，研发一种生产成本低；灵敏度、精密度、检测范围等检测性能好；能够方便、快速、简单、批量地检测妊娠相关蛋白A的产品，具有重要的意义。

发明内容

针对现有技术存在的需要一种生产成本低；灵敏度、精密度、检测范围等检测性能好；能够方便、快速、简单、批量地检测妊娠相关蛋白A的产品的技术问题，本发明提供妊娠相关蛋白A磁微粒化学发光检测试剂盒及其使用方法。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

妊娠相关蛋白A磁微粒化学发光检测试剂盒，包括相互独立包装的荧光素标记的PAPP-A抗体的溶液、碱性磷酸酶标记的PAPP-A抗体的溶液、包被荧光素抗体的磁微粒悬浮液、PAPP-A校准品、发光底物的溶液。

进一步的，所述碱性磷酸酶标记的PAPP-A抗体由碱性磷酸酶与PAPP-A抗体通过交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯连接而成。

进一步的，所述荧光素标记的PAPP-A抗体的溶液浓度为0.8～1.2μg/ml，pH为7～9。

进一步的，所述碱性磷酸酶标记的PAPP-A抗体的溶液浓度为0.5～0.8μg/ml，pH为7～9。

进一步的，所述荧光素标记的PAPP-A抗体的溶液通过包括以下步骤的操作制备而成：

Sa1：配置Tris-HCl缓冲液，使所述Tris-HCl缓冲液中含有4～8wt％的PEG-6000、0.7～0.9wt％的NaCl、0.08～0.1wt％的叠氮钠、0.58～0.62wt％的ProClin-300、0.8～1wt％牛血清白蛋白和19～21mM的EDTA，调节所述Tris-HCl缓冲液的pH为7～9；