[发明专利]一种α-糖苷酶抑制剂的快速筛选方法和应用在审
申请号: | 202010125627.5 | 申请日: | 2020-02-27 |
公开(公告)号: | CN111349685A | 公开(公告)日: | 2020-06-30 |
发明(设计)人: | 张作法;吕国英;宋婷婷;陈建飞;蔡为明 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34 |
代理公司: | 上海联科律师事务所 31350 | 代理人: | 赵旭 |
地址: | 310021 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 糖苷酶 抑制剂 快速 筛选 方法 应用 | ||
1.一种α-糖苷酶抑制剂的快速筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.将α-D-葡萄糖苷酶溶解于磷酸缓冲液中,将2-萘酚-α-D-葡萄糖苷溶解于乙醇中,将固蓝B盐溶解于水中;
S2.将不同浓度的被检测物、2-萘酚-α-D-葡萄糖苷与α-D-葡萄糖苷酶加入到微孔板中,混匀后,将微孔板放入生化培养箱中反应;
S3.反应结束后,在混合液中加入固蓝B盐溶液,混匀后,静置,根据颜色的深浅直接比较α-D-葡萄糖苷酶抑制活性的强弱,反应液浅黄色的被检测物活性最强,反应液深紫色的活性最弱。
2.根据权利要求1所述的α-糖苷酶抑制剂的快速筛选方法,其特征在于,S1中,α-D-葡萄糖苷酶50U/mL溶解于0.1M,pH=7.5的磷酸缓冲液中,2-萘酚-α-D-葡萄糖苷溶解于乙醇中配制成浓度为2mg/ml,固蓝B盐溶解于水中配制成浓度为2.5mg/ml。
3.根据权利要求2所述的α-糖苷酶抑制剂的快速筛选方法,其特征在于,S2中,不同浓度被检测物各10μl,2mg/ml的2-萘酚-α-D-葡萄糖苷10μl,50U/mLα-D-葡萄糖苷酶10μl加入到微孔板中,混匀后,将微孔板放入温度37℃,湿度80%的生化培养箱中,反应半小时。
4.根据权利要求3所述的α-糖苷酶抑制剂的快速筛选方法,其特征在于,S3中,反应结束后,在混合液中加入10μl固蓝B盐溶液,混匀后,静置10分钟。
5.一种α-糖苷酶抑制剂的应用,其特征在于,通过权利要求1所述的α-糖苷酶抑制剂的快速筛选方法筛选出的强活性的α-糖苷酶抑制剂在制备降低餐后血糖、治疗或预防糖尿病及糖尿病并发症的药物或食品中的应用。
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