[发明专利]一种离子液体对糖代谢影响的评估方法有效
申请号: | 202010129284.X | 申请日: | 2020-02-28 |
公开(公告)号: | CN111235208B | 公开(公告)日: | 2022-10-28 |
发明(设计)人: | 周磊;薛永来;崔雯;何锦 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 离子 液体 代谢 影响 评估 方法 | ||
1.一种离子液体对糖代谢影响的评估方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)HepG2细胞培养至贴壁后,换液至暴露溶液中初次暴露培养;
(2)测定初次暴露后HepG2细胞的存活率和暴露前后培养基中葡萄糖的消耗量,取存活率较高且对葡萄糖消耗量影响较大的处理组进行第二次暴露培养;
(3)对步骤(2)中第二次暴露培养后的HepG2细胞进行糖原含量、糖代谢相关基因的表达进行检测;
(4)对步骤(3)中的检测数据进行统计学分析,分析暴露试验后HepG2细胞糖代谢受到的影响,评估不同暴露浓度对糖代谢的毒性影响;步骤(3)中所述的糖代谢相关基因为GLUT1、PYGL、GSK3β、GYS2、PKM、PFKFB3、IDH2、PDK1和/或LDHA中的一种或多种;所述暴露溶液为1-丁基-3-甲基咪唑氯盐。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述暴露溶液的浓度为0~32mM。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述的暴露溶液的溶剂为暴露培养基,所述的暴露培养基以体积百分比计,每份暴露培养基中含有0.2%的牛血清白蛋白、1%的链霉素、1%的青霉素以及97.8%的DMEM高糖培养基。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述的初次暴露培养条件为37℃,含有5%CO2的细胞培养箱中培养24小时。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述的第二次暴露培养条件与初次暴露培养相同。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中所述的统计学分析为使用IBMSPSS Statistic 19对步骤(3)中数据进行分析。
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