[发明专利]一种阴道加德纳菌量子点免疫检测方法在审
申请号: | 202010131686.3 | 申请日: | 2020-02-29 |
公开(公告)号: | CN111208295A | 公开(公告)日: | 2020-05-29 |
发明(设计)人: | 李万寿 | 申请(专利权)人: | 济南德亨医学科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N21/64 |
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地址: | 250000 山东省济南市天桥区蓝*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 阴道 加德纳菌 量子 免疫 检测 方法 | ||
1.一种阴道加德纳菌量子点免疫检测方法,其特征在于,包括量子点荧光探针的制备方法及其使用方法。
一种量子点荧光探针的制备方法,包括如下步骤:
(1)采用EDC偶联法标记抗体,将量子点溶液和EDC溶液按照按1:5~1:10的比例混合,然后在常温、避光的条件下对混合溶液进行搅拌使之活化;
(2)加入过量的加德纳菌标记抗体,并调整整个溶液的反应pH,使得反应pH在6~8之间,将调整完成的混合溶液置于避光环境下反应1小时;
(3)对反应结束的液体进行超滤,在10000rpm条件下离心20分钟;
(4)吸出超滤后的标记抗体,用含20mM Tris、15%蔗糖、1%BSA,pH7.5~8.5的溶液复溶至原体积,如此,即得到制备好的量子点标记抗体。
一种量子点荧光探针的使用方法,包括如下步骤:
(1)根据需求挑取若干样本放置在载玻片上并制成涂片,然后用无水乙醇进行固定;
(2)将含有样本的载玻片标本水平放置,加10ul制备好的量子点标记抗体在标本上,使之完全覆盖在标本上;
(3)将制备好的载玻片置于37℃的环境下孵育25~35分钟,然后使用蒸馏水缓缓全覆盖洗涤3遍;
(1)将洗涤后的载玻片放置在显微镜下,使用荧光显微镜在100倍油镜条件下进行观察。
2.根据权利要求1所述阴道加德纳菌量子点免疫检测方法,其特征在于,一种量子点荧光探针的制备方法,步骤(1)中,所述量子点溶液和EDC溶液按照按1:5的比例混合,然后在常温、避光的条件下对混合溶液进行搅拌使之活化;步骤(2)中,调整整个溶液的反应pH,使得反应pH值为6,将调整完成的混合溶液置于避光环境下反应1小时;步骤(4)中,用含20mMTris、15%蔗糖、1%BSA,pH7.5的溶液复溶至原体积,如此,即得到制备好的量子点标记抗体。
3.根据权利要求2所述阴道加德纳菌量子点免疫检测方法,其特征在于,一种量子点荧光探针的制备方法,步骤(1)中,所述量子点溶液和EDC溶液按照按1:10的比例混合,然后在常温、避光的条件下对混合溶液进行搅拌使之活化;步骤(2)中,调整整个溶液的反应pH,使得反应pH值为8,将调整完成的混合溶液置于避光环境下反应1小时;步骤(4)中,用含20mMTris、15%蔗糖、1%BSA,pH8.5的溶液复溶至原体积,如此,即得到制备好的量子点标记抗体。
4.根据权利要求1所述阴道加德纳菌量子点免疫检测方法,其特征在于,一种量子点荧光探针的制备方法,步骤(1)中,所述量子点溶液和EDC溶液按照按1:8的比例混合,然后在常温、避光的条件下对混合溶液进行搅拌使之活化;步骤(2)中,调整整个溶液的反应pH,使得反应pH值为7,将调整完成的混合溶液置于避光环境下反应1小时;步骤(4)中,用含20mMTris、15%蔗糖、1%BSA,pH8.0的溶液复溶至原体积,如此,即得到制备好的量子点标记抗体。
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