[发明专利]比活及热稳定性提高的葡萄糖淀粉酶突变体GA3及其基因和应用在审
| 申请号： | 202010131742.3 | 申请日： | 2020-02-29 |
| 公开（公告）号： | CN111471666A | 公开（公告）日： | 2020-07-31 |
| 发明（设计）人： | 王兴吉;王克芬;张杰;佟新伟;刘文龙 | 申请（专利权）人： | 山东隆科特酶制剂有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/34 | 分类号： | C12N9/34;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 刘静荣 |
| 地址： | 276400 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 热稳定性 提高 葡萄糖 淀粉酶 突变体 ga3 及其 基因 应用 | ||
1.比活及热稳定性提高的葡萄糖淀粉酶突变体GA3，其特征在于，所述葡萄糖淀粉酶突变体GA3的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
2.一种制备权利要求1所述比活及热稳定性提高的葡萄糖淀粉酶突变体GA3的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)将葡萄糖淀粉酶TlGA1931的氨基酸序列的第132位碱基由Ser突变为Cys、第492位碱基由Tyr突变为Cys、第548位碱基由Leu突变为Cys、第562位碱基由Ala突变为Cys，得到葡萄糖淀粉酶TlGA1931的突变体GA1，其中，葡萄糖淀粉酶TlGA1931的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示；
(2)将葡萄糖淀粉酶TlGA1931的突变体GA1的氨基酸序列的第108位碱基由Gln突变为Glu得到葡萄糖淀粉酶突变体GA2；
(3)将葡萄糖淀粉酶TlGA1931的突变体GA2的氨基酸序列的第468、469、470位碱基由Ala、Tyr、Ser突变为Asp和Pro得到葡萄糖淀粉酶突变体GA3。
3.葡萄糖淀粉酶突变体基因，其特征在于，编码权利要求1所述的比活及热稳定性提高的葡萄糖淀粉酶突变体GA3。
4.根据权利要求4所述的葡萄糖淀粉酶突变体基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQID NO:8所示。
5.包含权利要求3所述的葡萄糖淀粉酶突变体基因的重组载体。
6.包含权利要求3所述的葡萄糖淀粉酶突变体基因的重组菌株。
7.制备比活及热稳定性提高的葡萄糖淀粉酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)用包含权利要求1所述的比活及热稳定性提高的葡萄糖淀粉酶突变体GA3的编码基因的重组载体转化宿主细胞，得重组菌株；
(2)培养重组菌株，诱导表达葡萄糖淀粉酶突变体；
(3)回收并纯化所表达的制备比活及热稳定性提高的葡萄糖淀粉酶。
8.权利要求1所述的制备比活及热稳定性提高的葡萄糖淀粉酶的应用。
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