[发明专利]从油橄榄叶中同时提取分离山楂酸、橄榄苦苷、齐墩果酸的方法

说明书

本发明涉及一种从油橄榄叶中同时提取分离山楂酸、橄榄苦苷、齐墩果酸的方法，包括以下步骤：将油橄榄叶粉碎后，用70‑90％的乙醇提取，提取液过滤，滤液减压回收乙醇，得到粗提液；将粗提液放置24小时沉淀，用离心机离心，得上清液和离心渣；将上清液上D101大孔吸附树脂柱，用乙醇溶液解析，喷雾干燥可得70％橄榄苦苷；将离心渣烘干，分别用50％和80％乙醇提取2次，浓缩结晶得山楂酸和齐墩果酸粗品，将山楂酸和齐墩果酸粗品分别用0.1‑0.2mol/l碳酸氢钠溶液重结晶，再用95％乙醇重结晶两次，可得收率大于90％，含量大于98％山楂酸和齐墩果酸。本发明可以同时提取3种有效成分，工艺适合工业化大生产并已运行产生效益，可以极大节约成本，对原料综合利用达到最大效益。

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种从油橄榄叶中同时提取分离山楂酸、橄榄苦苷、齐墩果酸的方法。

背景技术

油橄榄是世界著名的木本油料树种，有4000多年的栽培历史。油橄榄叶的煎剂或浸剂在地中海国家常作为糖尿病的民间用药，有一定的疗效。油橄榄叶提取物在美洲和欧洲用作膳食补充剂以增强免疫功能。现代资料表明，油橄榄叶中含有黄酮类、三萜类、糖类、裂环烯醚萜类等有效成分。三萜类化合物主要是由6个异戊二烯结构单元构成，大部分为含30个碳原子的萜类化合物。油橄榄叶中三萜类成分主要包括齐墩果酸、山楂酸和熊果酸，而这三种物质结构相似，通常采用柱色谱技术将其进行分离，但反复硅胶柱色谱分离和重结晶导致最终得到的样品量很少。由于柱色谱技术普遍存在处理周期长，连续操作性不强，不易作为分离介质用于生物活性物质的工业生产进程。

橄榄苦苷是橄榄中的苦味素，是一种苯酚类裂环烯醚萜苷，广泛存在于木犀科木犀榄属植物油橄榄等植物叶中。由于其在多种天然产物生物途径中的重要性，裂环烯醚萜类化合物被认为是木犀榄科植物化学分类学上的标记化合物，是多酚的主要成分之一。橄榄苦苷具有极强的抗氧化能力，用于护肤品可以促进肌肤原蛋白再生，纠正老化痕迹，自然抵御由氧化而导致的肌肤破坏，免受紫外线伤害，有效维持肌肤柔嫩与弹性，国外许多知名品牌的高档化妆品中均有添加。其抗氧化活性已经被众多学者所证实，同时橄榄苦苷具有强力的抗细菌和抗病毒特性，可用于制造治疗病毒、细菌、原生动物类、寄生虫和吸血虫等所引起的疾病和治疗感冒的新药。油橄榄叶提取物已在美洲和欧洲用作膳食补充剂以增强免疫功能。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种，该方法简单，周期短，得到的齐墩果酸纯度高，收率大。

为实现上述目的，本发明采用以下的技术方案实现：

一种从油橄榄叶中同时提取分离山楂酸、橄榄苦苷、齐墩果酸的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

步骤a：将油橄榄干叶除杂、破碎，用体积浓度为70～90％的乙醇溶液提取，将提取液趁热过滤，取滤液减压回收乙醇，加稀释得到粗提液；

步骤b：将粗提液放置沉淀，用离心机离心，得上清液和离心渣；

步骤c：取步骤二的上清液采用大孔树脂柱层析法纯化，上清液经大孔树脂吸附，水洗，醇度60％-90％的乙醇溶液解吸附后，收集解吸液，解吸液回收溶剂后真空浓缩，干燥，得到质量百分数达到70％以上橄榄苦苷；

步骤d：将步骤b的离心渣烘干，依次用4-6倍量45％-55％和75％-85％乙醇加热提取2次，每次1小时，分别浓缩，结晶得山楂酸和齐墩果酸粗品；

步骤e：将山楂酸和齐墩果酸粗品进行重结晶，可得含量大于98％山楂酸和齐墩果酸。

优选的，步骤a中，油橄榄干叶与溶剂的重量体积比为1:5-15，所述步骤a的提取方法为加热回流、浸渍或渗漉，所述加热回流的次数为二次或二次以上，每次1-3小时。

优选的，步骤a中，所述油橄榄干叶为新鲜的油橄榄叶经阴干得到，或者在70-110℃下干燥1-3h得到；所述油橄榄干叶中的含水量低于10％，橄榄苦苷含量不低于6％。