[发明专利]SARS-CoV-2检测试剂盒

说明书

本发明涉及病毒检测技术领域，具体而言，涉及一种SARS‑CoV‑2检测试剂盒；所述试剂盒包括a)与固相支持物偶联的RBD特异性配体，b)偶联有吖啶类荧光团的标记物的RBD重组蛋白，以及：用于溶解a组分的第一缓冲液，pH＝5.5～6.5；用于溶解b组分的第二缓冲液，pH＝5.5～8.5；用于裂解样本以释放病毒中的RBD抗原的第三缓冲液，pH＝3.0～4.5。该试剂盒操作方便，且具有较高的检出率和准确性。

技术领域

本发明涉及病毒检测技术领域，具体而言，涉及一种SARS-CoV-2检测试剂盒。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-CoV-2，亦被称为2019-nCoV、HCoV-19)属于β属的冠状病毒，颗粒呈圆形或椭圆形直径60nm～140nm，基因特征与SARS具有明显的区别，且相比于SARS具有更高的感染能力。基于流行病学调查，COVID-19 的潜伏期为1～14天，多为3～7天，症状以发热、干咳、乏力为主，重症患者多在发病一周后出现呼吸困难和/或低氧血症，严重者可快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出现凝血功能障碍及多器官功能衰竭等。因此，如何快速确诊疑似病例，以及如何有效监控疾病进程，将为治疗COVID-19，打好疫情攻坚战的重点。

据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第六版)》中规定，目前确诊COVID-19 的方法为使用实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性，或病毒基因测序与已知的新型冠状病毒高度同源。但疫情发展至今，核酸检测试剂的漏检问题一再暴露，阳性检出率只有30％～50％，主要是由于检测方式的局限性造成的。核酸检测，一般是通过收集鼻咽拭子、疑似患者的痰、血液、粪便，提取其中的 RNA片段进行荧光RT-PCR，采样过程中会混入大量人体细胞、细菌，进而造成待测RNA丰度低，检测系统无法检测，最终导致假阴性的产生。同时，除抽血外，其余采样方式均会造成采样人员暴露于可能含有病原体的环境中，有潜在的感染风险。而且核酸检测样品的制备过程，需要步骤多、操作时间长，对检测人员的技术水平要求高。

发明内容

本发明涉及一种SARS-CoV-2检测试剂盒，其包括a)与固相支持物偶联的 RBD特异性配体，b)偶联有吖啶类荧光团的标记物的RBD重组蛋白，以及：

用于溶解a组分的第一缓冲液，pH＝5.5～6.5；

用于溶解b组分的第二缓冲液，pH＝5.5～8.5；

用于裂解样本以释放病毒中的RBD抗原的第三缓冲液，pH＝3.0～4.5。

本发明所提供的试剂盒采用RBD重组蛋白与样本中的RBD蛋白竞争与固相支持物偶联的RBD特异性配体，再检测RBD重组蛋白上的吖啶类荧光团即可进行定量分析。

本试剂第一缓冲液pH略偏酸性，能够将经过第三缓冲液处理的样品中pH 调整至抗原与包被于固相支持物上的RBD特异性配体结合的合适pH条件，适合于吖啶类荧光团的发光检测，提高检出率和准确性。在检测过程中，无需对样品进行RNA提取操作，检测步骤较少，操作时间缩短，可避免因RNA丰度低导致的假阴性结果。而且可配合使用自动的化学发光测定仪，减少了人员与可能携带病原体样本的接触，最大程度上降低感染几率。同时，化学发光技术本身检测灵敏，检测速度快，远远优于核酸检测。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明一个实施例中转染后的细胞样品WB图。

具体实施方式