[发明专利]一种测算人体生物年龄的方法

权利要求书

1.一种测算人体生物年龄的方法，其特征在于包括以下步骤：获得测算对象的端粒体绝对长度r，根据测算对象的性别和年龄对其进行分组，分组方法为：某一性别，对于出生年龄在0-20岁的人群，建立一个分组；对于出生年龄20岁以上的人群，每5岁进行一次分组；然后将r代入其所属性别和年龄段的模型中，获得生物年龄；所述模型根据测算对象的性别和年龄对其进行分组，每个分组设有对应的数据库和测试模型：N=(r-L)/K；

其中，N为测算对象的生物年龄；

r为测算对象的端粒体绝对长度；

斜率：

截距：

m为某性别某年龄段数据库的样本总数；i为编号；α为某编号对应样本的修正后的端粒体绝对长度；β为编号对应样本的生物年龄；

a为样本检测时的出生年龄；c为样本在后续持续跟踪检测中统计到的寿命，若无该样本的寿命信息，则使用该性别和年龄段的寿命平均值；v为样本中患有重大疾病的数量；i代表编号，b_i表示某疾病的患病年限；d为数据库中某性别某年龄段样本寿命的中位值；

所述测试模型的构建方法包括以下步骤：

1）DNA杂交法检测数据库中每个样本的端粒体绝对长度t；

2）实时荧光扩增PCR法检测数据库中每个样本的端粒体相对长度l；

3）建立端粒体绝对长度t和端粒体相对长度l的换算模型和人群端粒长度数据库：统一步骤1）和步骤2）两种方法的测量结果，对于样本数量为n的群体，i为编号，根据二元加权线性回归法，建立端粒体绝对长度t关于端粒体相对长度l的标准曲线：

斜率：

截距：

拟合系数：

其中，s为所有l_i的平均值；q为所有t_i的平均值，

该标准曲线用于筛选两种方法测试结果不一致的样本，并重新测试；以拟合系数R²0.9的拟合曲线中的端粒体绝对长度t，作为修正后的端粒体绝对长度α，建立不同性别各年龄段端粒体长度数据库；

4）建立生物年龄算法模型：

4.1）对数据库中不同性别和不同年龄段的人群进行分组，并计算数据库中每个样本在该年龄段时测得的生物年龄β；

4.2）分别对于不同性别不同年龄段的样本，某性别某年龄段数据库的样本总数为m，i代表编号，以样本的生物年龄β为权重，使用加权最小二乘法求生物年龄β关于修正后的端粒体绝对长度α的线性方程；

最终测算人体生物年龄的模型为N=(r-L)/K。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述重大疾病包括冠心病、肺功能疾病、肝功能疾病、肾功能疾病和肿瘤。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述m不小于500。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）中，端粒体绝对长度t计算公式为：

样本进行DNA杂交法获得的荧光信号条带被两端marker的荧光信号条带分成w个小方格，其中i是每一个小方格的编号，OD_i是小方格内化学发光信号总强度，L_i是小方格位置的maker分子量。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）中：从实时荧光PCR仪中获得目标DNA端粒体区段的扩增结果CT值为T₀，标准品DNA端粒体区段的扩增结果CT值分别为T₁,T₂,T₃,T₄,T₅；目标DNA单拷贝基因区段的扩增结果CT值为B₀，标准品DNA单拷贝基因区段的扩增结果CT值分别为B₁,B₂,B₃,B₄,B₅；

对于标准品DNA端粒体区段扩增结果，以CT值为权重，使用加权最小二乘法求CT值关于DNA浓度对数值的标准曲线：

斜率：

截距：

上述公式中i为编号；c_i为标准品DNA的模板量；T_i为对应模板量DNA端粒体区段的扩增结果CT值；

计算目标DNA端粒体相对浓度d1=e^[(T₀-b₁)/a₁]，e为自然常数；

对于标准品DNA单拷贝基因区段扩增结果，同样以CT值为权重，使用加权最小二乘法求CT值关于DNA浓度对数值的标准曲线：

斜率：

截距：

上述公式中i为编号；c_i为标准品DNA的模板量；B_i为对应模板量DNA单拷贝基因区段的扩增结果CT值；

计算样本DNA单拷贝基因相对浓度d2=e^[(B₀-b₂)/a₂]，e为自然常数；

最终求得样本DNA的端粒体相对长度l=d1/d2。