[发明专利]一种猪RagA基因及其应用

说明书

本发明公开了一种猪RagA基因及其应用。本发明首次扩增出猪RagA基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。并提供了该基因的核苷酸序列及其编码的蛋白质的氨基酸序列，研究发现过表达RagA基因能够显著增加肠上皮细胞的活力，同时显著增加mTORC1信号通路关键靶标p‑mTOR和p‑S6K1蛋白质的表达水平，激活mTORC1信号通路；因此，猪RagA基因或其编码的蛋白质在氨基酸感应中具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域。更具体地，涉及一种猪RagA基因及其应用。

背景技术

RagA，Rag GTPase成员之一，在哺乳动物中其余3个成员分别为RagB、RagC、RagD，均属于Ras小G蛋白家族。RagA和RagB高度同源、RagC和RagD高度同源，RagA或RagB能够与RagC或RagD结合形成异二聚体。现有研究证明，Rag GTPase能够介导氨基酸激活mTORC1信号通路，尤其是亮氨酸和精氨酸。细胞内氨基酸水平调控Rag GTPase核苷酸状态，RagGTPase处于活化状态时RagA结合GTP，RagC结合GDP；形成的异二聚体通过与mTORC1组分Raptor亚基特异性结合将mTORC1募集至溶酶体表面，从而激活mTORC1信号。

目前，现有关于RagA的研究集中于人、小鼠和酵母上(Sancak Y等2008，Kim YC等2014，Fukuda T等2018)，而未有关于猪RagA的研究报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有猪RagA的研究空白，提供一种猪RagA基因及其应用。

本发明的目的是提供一种猪RagA基因。

本发明另一目的是提供所述猪RagA基因编码的蛋白质。

本发明又一目的是提供所述猪RagA基因的制备方法。

本发明再一目的是提供一种重组载体。

本发明再一目的是提供所述猪RagA基因、所述蛋白质或所述重组载体在氨基酸感应中的应用。

本发明再一目的是提供一组检测所述猪RagA基因的引物。

本发明再一目的是提供所述引物在检测猪RagA基因和/或制备猪RagA基因检测试剂盒中的应用。

本发明再一目的是提供一种检测猪RagA基因的方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明首先提供了一种猪RagA基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了所述猪RagA基因编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了所述猪RagA基因的制备方法，以cDNA为模板，利用引物F1/R1或引物F2/R2进行PCR扩增。

所述引物F1/R1的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示：

引物F1(SEQ ID NO.3)的核苷酸序列：5'-atgccaaatacagccatgaaga-3'；

引物R1(SEQ ID NO.4)的核苷酸序列：5'-tcaacgcataaggaggctgtg-3'。

所述引物F2/R2的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示：

引物F2(SEQ ID NO.5)的核苷酸序列：5'-gctctagagccaccatggattac aaggatgacgacgataagatgccaaatacagccatg-3'；