[发明专利]一种均相法化学发光检测方法

权利要求书

1.一种均相法化学发光检测方法，它包括采用夹心法的反应原理对检测物进行检测，其特征是对检测物进行检测的试剂盒是由纳米金光敏颗粒和发光微粒组成，所述纳米金光敏颗粒是纳米金颗粒和光敏剂的复合物再与特异性结合配对的化合物偶联后的偶联体；所述发光微粒是发光微球与抗体等生物活性分子的结合物。

2.根据权利要求1所述的一种均相法化学发光检测方法，其特征是包括纳米金光敏颗粒和发光微粒的制备，所述的纳米金光敏颗粒的制备包括采用纳米金颗粒，获得纳米金颗粒后进行纳米金-光敏剂复合，所述纳米金-光敏剂的复合是在纳米金颗粒中加入水溶性光敏剂，并在室温下暗室中搅拌过夜，然后通过离心最后得到沉淀的纳米金-光敏剂复合物，然后再用缓冲液将纳米金-光敏剂复合物复溶；复溶后的纳米金-光敏剂复合物再与可以产生特异性结合配对的化合物进行偶联，所述纳米金-光敏剂与可以产生特异性结合配对的化合物的偶联是在复溶后的纳米金-光敏剂复合物的溶液中加入可以产生特异性结合配对的化合物，调整反应pH值至可以产生特异性结合配对的化合物的等电点，通过纳米金颗粒所具有的电荷性将可以产生特异性结合配对的化合物在其等电点环境条件下使两者产生静电吸附或共价结合，从而使可以产生特异性结合配对的化合物偶联至纳米金颗粒表面，再通过离心方式除去未结合的可以产生特异性结合配对的化合物，然后再加入复溶缓冲液进行复溶，获得悬浮于复溶缓冲液中的纳米金光敏颗粒。

3.根据权利要求2所述的一种均相法化学发光检测方法，其特征是所述的发光微粒的制备是购买PE公司的（Alpha Acceptor beads）发光微球，采用共价偶联的方式包被抗体等生物活性分子，在1ml发光微球中加入Buffer A 0.5-1mL混匀，用0.2-0.5mL EDC活化10-30min，加入0.3-1ml抗体震荡反应2-5h，封闭5-30min，加入Buffer B 至终体积50mL，搅拌均匀即制成发光微粒。

4.根据权利要求2所述的一种均相法化学发光检测方法，其特征在于，所述纳米金颗粒与光敏剂的摩尔比为2:1-10。

5.根据权利要求2所述的一种均相法化学发光检测方法，其特征在于所述水溶性光敏剂为卟啉衍生物、酞菁衍生物或叶绿素衍生物。

6.根据权利要求2或4或5所述的一种均相法化学发光检测方法，其特征在于所述的静电吸附，其时间为1小时至2小时。

7.根据权利要求2或4或5所述的一种均相法化学发光检测方法，其特征在于所述的缓冲液为PBS、HEPES、硼酸盐、碳酸盐、Tris-HCl、柠檬酸中的一种；所述的复溶缓冲液为PBS、HEPES、碳酸盐、Tris-HCl中的一种。

8.根据权利要求6所述的一种均相法化学发光检测方法，其特征在于所述的缓冲液为PBS、HEPES、硼酸盐、碳酸盐、Tris-HCl、柠檬酸中的一种；所述的复溶缓冲液为PBS、HEPES、碳酸盐、Tris-HCl中的一种。