[发明专利]一种SMN1和SMN2基因拷贝数的检测试剂盒

权利要求书

1.一种SMN1和SMN2基因拷贝数的PCR扩增反应检测引物，其特征在于：所述引物包含8种不同的引物，

其中第一引物为黏合SMN1与SMN2第7外显子差异位点上游区域的通用引物，同时第一引物5’端包含非人源性基因组序列SEQ ID NO.1；第二引物黏合SMN1与SMN2第7外显子的差异位点区域，特异性黏合SMN1第7外显子序列，同时第二引物5’端包含非人源性基因组序列SEQ ID NO.2；第三引物黏合SMN1与SMN2第7外显子的差异位点区域，特异性黏合SMN2第7外显子序列，同时第三引物5’端包含非人源性基因组序列SEQ ID NO.2；

第四引物为黏合SMN1与SMN2的第8外显子差异位点下游区域的通用引物，同时第四引物5’端包含与第一引物相同或部分相同的非人源性基因组序列SEQ ID NO.1；第五引物黏合SMN1与SMN2第8外显子的差异位点区域，特异性黏合SMN1第8外显子序列，同时第五引物5’端包含非人源性基因组序列SEQ ID NO.2；第六引物黏合SMN1与SMN2第8外显子的差异位点区域，特异性黏合SMN2第8外显子序列，同时第六引物5’端包含非人源性基因组序列SEQID NO.2；

第七引物包含第一引物和第四引物的非人源基因组序列SEQ ID NO.1，第八引物包含第二引物、第三引物、第五引物和第六引物的非人源基因组序列SEQ ID NO.2，其中第八引物且具有荧光标记。

2.根据权利要求1所述的检测引物，其特征在于：第二引物与第三引物的3’端末端碱基分别与SMN1和SMN2第7外显子的差异位点保持一致，同时第二引物与第三引物的3’端倒数第二个或第三个碱基引入错配碱基。

3.根据权利要求1所述的检测引物，其特征在于：第五引物与第六引物的3’端末端碱基分别与SMN1和SMN2第8外显子的差异位点保持一致，同时第二引物与第三引物的3’端倒数第二个或第三个碱基引入错配碱基。

4.根据权利要求1所述的检测引物，其特征在于：第二引物或第三引物其中一条引物5’端包含至少5个以上碱基的非人源基因组序列SEQ ID NO.3。

5.根据权利要求1所述的检测引物，其特征在于：第五引物或第六引物其中一条引物5’端包含至少5个以上碱基的非人源基因组序列SEQ ID NO.3。

6.根据权利要求1所述的检测引物，其特征在于：在8种引物的PCR扩增反应中，还包含一组或两组以上的管家基因引物对，选自GAPDH、ACTB、HBB、CFTR或RPP30 。

7.根据权利要求6所述的检测引物，其特征在于：管家基因的上游与下游引物5’端分别包含非人源性基因组序列SEQ ID NO.1与SEQ ID NO.2。