[发明专利]一种与骨髓瘤细胞高表达抗原HLA-E特异性结合的多肽及其用途

说明书

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种对骨髓瘤细胞高表达的表面抗原HLA‑E有特异性结合的多肽及其用途。该多肽为以下任意（1）多肽的氨基酸序列为：NALDEDCEDKNR，NALDELGEHRNW，NALDESWEDKNR，NALDEYCEDKNR；（2）在（1）所述的多肽分子中经过缺失、插入或置换一个或几个氨基酸且与（1）所述的多肽分子具有相同生物学功能的多肽衍生物。所述多肽及其衍生物在制备肿瘤诊断试剂盒中的应用。本发明提供的多肽作用效果明显，为临床早期诊断和靶向药物的研发提供了可靠的科学依据，为多发性骨髓瘤的靶向治疗提供新的选择。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种对骨髓瘤细胞高表达的表面抗原HLA-E有特异性结合的多肽及其用途。

背景技术

HLA-E 基因被发现于1988 年，它在正常细胞表面的膜蛋白表达水平相对于经典的HLA-I 类分子HLA-A、B、C 来说较低，HLA-E 分子是NK 细胞表面受体CD94 /NKG2 的配体，可通过CD94 /NKG2A 抑制NK 细胞的活性，也可通过CD94 /NKG2C 活化NK 细胞的细胞毒作用。HLA-E 分子表达水平的改变可见于某些病理环境或特殊组织细胞中。有研究表明，多种病毒感染的细胞可通过提高HLA-E 的表达逃避NK 细胞免疫监视，如HCMV、HIV、HCV及HPV等。多种肿瘤细胞表面如卵巢癌、淋巴瘤、神经胶质瘤、结肠癌、黑色素瘤、乳腺癌等检测到HLA-E 的高量表达。

多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是第二常见的血液系统恶性疾病，是以骨髓浆细胞克隆增殖的恶性肿瘤，约占血液肿瘤的10%。近年来随着新型药物的不断研发以及自体干细胞移植的开展，ＭＭ 的预后得到显著改善，其中位生存期达到7～10年。但大部分患者最终难免复发，ＭＭ 仍不可治愈。目前ＭＭ 免疫治疗发展迅速，为治疗ＭＭ 带来了更多的策略。免疫治疗相对于传统的化疗，特异性更高，毒副作用更小，主要包括单克隆抗体、双特异性抗体、免疫检查点阻断剂树突状细胞疫苗、过继细胞治疗等。虽然目前的治疗手段已经显著延长了该疾病的生存期，但是多发性骨髓瘤可能出现的一系列并发症，包括造血相关并发症（贫血，骨髓衰竭，出血表现），骨相关并发症（病理性骨折，溶骨损伤，高钙血症），肾功能不全以及免疫及神经功能损伤，则大大降低了患者的生活质量。因此，新的治疗方式，尤其是免疫相关的治疗方式亟待研发。

发明内容

鉴于现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种对骨髓瘤细胞高表达的表面抗原HLA-E有特异性结合的多肽及其用途。所述的多肽能特异性与多发性骨髓瘤高表达表面抗原HLA-E靶向结合，而正常浆细胞由于几乎不表达HLA-E，所以几乎没有影响，这对于特异识别多发性骨髓瘤细胞具有重要的意义，不仅提供了识别多发性骨髓瘤的药物作用靶点，同时该多肽亦可以靶向亲和该靶点。

本发明以生物信息学的方式发现HLA-E在骨髓瘤细胞高表达，同时检测多发性骨髓瘤患者以及正常人浆细胞HLA-E mRNA以及蛋白水平的表达，证实HLA-E确实可以作为识别多发性骨髓瘤的靶点。利用HLA-E与来自NK细胞表面的CD94/NKG2A的相互作用，寻找到二者结合的关键区域。分析并筛选关键区域的氨基酸结构，最终从CD94上获取模板氨基酸序列。然后应用计算机辅助设计药物软件Molecular Operating Environment (MOE)将模板肽与HLA-E进行docking，随后利用突变非关键氨基酸的方法构建肽库，筛选出高亲和力的肽段。设计出具有靶向HLA-E高亲和力的肽段，可以特异性识别出HLA-E高表达的骨髓瘤细胞，可以为多发性骨髓瘤的靶向治疗提供新的选择。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种与多发性骨髓瘤细胞表面HLA-E抗原特异性结合的多肽，该多肽为以下任意：