[发明专利]一种光谱分析方法和装置在审
申请号: | 202010143875.2 | 申请日: | 2020-03-04 |
公开(公告)号: | CN113358882A | 公开(公告)日: | 2021-09-07 |
发明(设计)人: | 李久彤;周雪雷;陈向军;关明;王晓梅;孙世娇 | 申请(专利权)人: | 上海鑫谱生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/74 | 分类号: | G01N33/74;G01N33/68;G01N21/65 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 徐林强;崔佳佳 |
地址: | 201318 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 光谱分析 方法 装置 | ||
本发明涉及一种光谱分析方法和装置。具体地,本发明提供一种光谱分析方法,所述的方法包括步骤:(a)提供一待测样品,所述待测样品含有待检测的测试物;(b)在一容器内,将所述待测样品与捕获颗粒和检测颗粒进行混合,从而形成含“捕获颗粒‑测试物‑检测颗粒”的复合物的第一混合物;(c)对所述“捕获颗粒‑测试物‑检测颗粒”的复合物进行清洗后,将“捕获颗粒‑测试物‑检测颗粒”的复合物分散成混悬液后,使混悬液处于持续运动状态下进行光谱信号的测定。本发明所述的光谱分析方法能够提高分析的重复性和稳定性,从而提高测定的准确性。
技术领域
本发明属于体外检测技术领域,具体地涉及一种光谱分析方法和装置。
背景技术
在免疫检测领域中,常常需要对各类抗原或抗体进行定性或定量检测。现有技术中,以“竞争抑制和双抗夹心”为基础衍生出多种免疫反应分析方法,如:放射免疫法、酶联免疫法、化学发光法、时间分辨荧光法、荧光免疫法和表面增强拉曼(SERS)免疫分析法等,可用于确定病原微生物,对人体的特异性蛋白定量检测,从而对疾病进行辅助诊断或监测等等,用途非常广泛。其中SERS方法因其超高的灵敏度、多指标同时检测和光信号稳定的特点而备受研究者的瞩目。
SERS免疫分析的基本原理是:将针对目标分析物的捕获抗体(Ab1)固定于固相拉曼增强基底(一般为金、银薄膜或金、银纳米微粒或金、银与无机材料组成的复合纳米微粒),针对目标分析物的信号抗体(Ab2)也固定在另一类似材料的纳米微粒上,同时该纳米微粒表面还固定有拉曼报告分子(Ranman Report,RR)。当阳性样本与Ab1和Ab2形成“三元夹心复合物”时,纳米微粒的近表面(一般小于5nm)和彼此聚集靠近的纳米微粒间的狭缝形成了“热点结构”,使RR的信号得到极大增强,目标分析物越多,形成的“三元夹心复合物”越多,相应地,“热点结构”和RR越多,拉曼信号越强,从而对目标分析物进行定量定性分析。
由于纳米微粒表面的RR极易受到“热点结构”的影响,而每次免疫反应所形成的“热点结构”数量和状态很难做到一致,所以最终测到的拉曼信号波动较大,从而严重影响了SERS的定量检测性能。
因此,本领域需要对SERS磁免疫分析技术进行持续改进,降低拉曼信号波动性,提高SERS磁免疫分析的重复性和稳定性。。
发明内容
本发明的目的在于提供一种SERS磁免疫分析方法,提高SERS磁免疫分析的重复性和稳定性,从而能够准确测定血清、血浆、全血或缓冲液样品中的待测物质。
本发明的另一个目的在于提供了一种检测待测物的光谱分析系统。
本发明的第一方面提供一种光谱分析方法,包括步骤:
(a)提供一待测样品,所述待测样品含有待检测的测试物;
(b)在一容器内,将所述待测样品与捕获颗粒和检测颗粒进行混合,从而形成含“捕获颗粒-测试物-检测颗粒”的复合物的第一混合物;
其中,所述的捕获颗粒为负载有第一捕获剂的磁性颗粒;而所述的检测颗粒为负载有第二捕获剂且标记有信号分子的固相载体;
其中,所述的第一捕获剂和第二捕获剂均特异性针对所述测试物,并与所述测试物结合形成“第一捕获剂-测试物-第二捕获剂”的三元复合物;
(c)对所述“捕获颗粒-测试物-检测颗粒”的复合物进行清洗后,将“捕获颗粒-测试物-检测颗粒”的复合物分散成混悬液后,使混悬液处于持续运动状态下进行光谱信号的测定。
在另一优选例中,所述的光谱信号的测定包括:
将激发光从所述容器的底部射入,并测量处于持续运动状态下的“捕获颗粒-测试物-检测颗粒”的复合物经照射后产生的光谱信号。
在另一优选例中,所述待检测的测试物选自下组:降钙素原、白细胞介素6,或其组合。
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