[发明专利]一种基于火球菌铁蛋白的新型冠状病毒S蛋白双区域亚单位纳米疫苗有效
| 申请号： | 202010144032.4 | 申请日： | 2020-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN111217919B | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 张辉;马显才;邹帆;袁耀昌;李镕;张旭 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/385;A61K39/215;A61P31/14 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 孙凤侠 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 火球 铁蛋白 新型 冠状病毒 蛋白 区域 单位 纳米 疫苗 | ||
1.一种提高冠状病毒抗原免疫原性的方法，其特征在于，所述方法将病毒的受体结合域(Receptor binding domain,RBD)和融合肽(Fusion peptide,FP)共同作为双抗原，并与火球菌多聚物蛋白(Pyrococcus furiosus_Ferritin,Ferritin(PF))融合组成一个新的融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin后作为抗原；
其中，受体结合域RBD的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；
融合肽FP的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；
火球菌多聚物蛋白Ferritin(PF)的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述冠状病毒抗原为新型冠状病毒SARS-CoV-2抗原，所述冠状病毒的受体结合域RBD和融合肽FP为新型冠状病毒SARS-CoV-2的受体结合域RBD和融合肽FP。
3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述新型冠状病毒SARS-CoV-2抗原为新型冠状病毒SARS-CoV-2的表面刺突蛋白(S蛋白)抗原。
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，新型冠状病毒SARS-CoV-2的RBD的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，FP的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，SEQ ID NO:1与SEQ ID NO:2可以直接连接，或两者以铰链区Linker相连构成一个新的融和蛋白RBD-FP。
5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，当所述Linker为GGSGGSGGSGGSGGG时，所得融和蛋白RBD-FP的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
6.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述Ferritin(PF)的氨基酸序列如SEQ IDNO:4所示；SEQ ID NO:3与SEQ ID NO:4可以直接连接，或两者以铰链区Linker相连构成一个新的融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin。
7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，当所述Linker为GSG时，所得融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。
8.根据权利要求1-7任一所述方法，其特征在于，融和蛋白再加上信号肽及纯化标签后，利用真核表达系统表达出抗原。
9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，所述信号肽为分泌型信号肽(Signalpeptide,SP)。
10.根据权利要求8所述方法，其特征在于，所述纯化标签为His标签 (His-tag)。
11.根据权利要求8所述方法，其特征在于，新型冠状病毒SARS-CoV-2的SP、His-tag、RBD与FP融合的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。
12.根据权利要求8所述方法，其特征在于，所述SEQ ID NO:4与SEQ ID NO:6所示序列可以直接连接，或两者以铰链区Linker相连构成一个新的融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin。
13.根据权利要求12所述方法，其特征在于，当所述Linker为GSG时，所得融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示。
14.一种免疫原性提高的冠状病毒抗原，其特征在于，依据权利要求1-13任一所述方法构建得到的新的融合蛋白RBD-FP-PF_Ferritin。
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