[发明专利]一种蛋氨酸亚砜还原酶及其编码基因、制备方法和用途

权利要求书

1.一种蛋氨酸亚砜还原酶，其特征在于，所述蛋氨酸亚砜还原酶氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。

2.一种蛋氨酸亚砜还原酶基因，其特征在于，所述蛋氨酸亚砜还原酶基因编码如权利要求1所述的蛋氨酸亚砜还原酶。

3.根据权利要求2所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因，其特征在于，所述蛋氨酸亚砜还原酶基因的cDNA序列如SEQ ID NO.2所示。

4.包含权利要求2或3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因的重组表达载体、重组细胞系或重组菌株。

5.权利要求1所述的蛋氨酸亚砜还原酶、权利要求2或3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因，或者权利要求4所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因的重组表达载体、重组细胞系或重组菌株在如下(C1)-(C2)中至少一种的用途：

(C1)制备用于还原蛋氨酸亚砜的产品；

(C2)制备用于抗氧化的产品。

6.一种如权利要求1所述的蛋氨酸亚砜还原酶的制备方法，其特征在于，包括：

S1，构建表达如权利要求1所述蛋氨酸亚砜还原酶的重组表达载体；

S2，以所述重组表达载体转化目标菌株，获得重组菌株；

S3，对所述重组菌株进行发酵培养，诱导蛋白表达；

S4，分离纯化所述重组菌株表达的蛋白，获得蛋氨酸亚砜还原酶。

7.一种制备权利要求3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因的cDNA序列的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）提取雨生红球藻的总RNA并逆转录为cDNA；

所述蛋氨酸亚砜还原酶基因的cDNA片段的扩增引物包括：HpMsrA-F，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3 所示；HpMsrA-R，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4 所示；

（2）以雨生红球藻的cDNA为模板进行扩增，获得蛋氨酸亚砜还原酶基因的cDNA片段；

（3）对所述蛋氨酸亚砜还原酶基因的cDNA片段进行5’-RACE扩增和3’-RACE扩增，获得5’-RACE扩增片段和3’-RACE扩增片段；

所述5’-RACE扩增片段的扩增引物包括：GSP5-1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.5 所示；GSP5-2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.6 所示；GSP5-3，其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；

所述3’-RACE扩增片段的扩增引物包括：GSP3-1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.8 所示；GSP3-2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.9 所示；GSP3-3，其核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；

（4）将所述5’-RACE扩增片段和所述3’-RACE扩增片段测序后，进行序列拼接，获得所述蛋氨酸亚砜还原酶基因的cDNA序列。

8.一种蛋氨酸亚砜还原酶的检测引物，其特征在于，所述检测引物基于权利要求2或3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因设计；

所述检测引物包括：HpMsrA-qF，其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；HpMsrA-qR，其核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。